| 초록 |
본 발명은 인간 간 마이크로좀을 이용한 약물 대사체의 간독성 스크리닝 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 인간 간암 세포주인 HepG2 세포에 인간 간 마이크로좀(human liver microsomes; HLM) 및 S9 분획을 처리하여 간독성을 비교한 결과 HLM을 처리한 군에서 더욱 민감한 독성이 관찰되었고, 상기 HLM을 처리하였을 때 대사활성화 시스템의 최적 조건을 확립하였다.또한, 약물 대사체에 의한 독성평가 결과, 시클로포스파미드(cyclophosphamide; CPA), 아세트아미노펜(acetaminophen) 및 디클로페낙(diclofenac)에서는 독성 증가 및 레프루노마이드(leflunomide), 바쿠치올(bakuchiol) 및 네파조돈(nefazodone)에서는 독성이 감소하고, 광범위 시토크롬 P450(cytochrome P450, CYP) 억제제인 1-아미노벤조트리아졸(1-aminobenzotriazole)을 처리하거나 또는 NADPH-생성 시스템을 제거함으로써 CPA 및 아세트아미노펜의 독성증가, 및 레프루노마이드의 독성감소가 CYP 매개이고, 디클로페낙, 바쿠치올 및 네파조돈은 다른 요인에 의해 독성이 변화됨을 확인하였다.또한, 선택적인 CYP 억제제를 처리하였을 경우, CPA 및 레프루노마이드에 의한 독성에 있어서 각 CYP 아이소형의 기여도를 확인하였고, 열-불활성화된 HLM을 이용한 연구결과, 네파조돈 및 바쿠치올의 독성 약화가 비특이적인 단백질 결합에 의한 것이며, 본 발명의 간독성 스크리닝 방법을 통해 생성되는 독성 대사체를 분석함으로써 본 발명의 간독성 스크리닝 방법이 모약물뿐만 아니라, 이의 대사체에 대한 간독성 확인에 유용하게 사용될 수 있다. |
