| 초록 |
□ 연구개요 본 연구는 아토피피부염의 근본적인 치료를 위해 하태독에 사용된 여러 한약재를 탐색하여 치료처방을 구성하고, endocanabinoid system (ECS)의 조절가능성을 탐색하여 canabinoid recetor의 활성에 의한 피부와 중추신경계의 항상성-재구축 (remodeling of homeostsis)의 아토피피부염 치료 기전을 확립함. 이를 통해 최종적으로 아토피피부염 치료 및 예방 목적의 치료처방 도출 및 전임상연구가 목적임. □ 연구 목표대비 연구결과 ○ 하태독법 처방구성 약물의 ECS 조절 가능성 조사 및 처방 구성 - 두시추출물 성분 중 genistein가 CB agonist로서의 ECS 조절가능성을 확인함. ○ Ear swelling model(Balb/c)에서 시기별 항상성 유지 기능 검증 - 피부내 단계별 조직화적 구조 변화 확인함. - 피부내 cannabinoid receptor 1 (CB1R) / 2 (CB2R) 활성 확인함. ○ 각질층 손상 피부염모델(Balb/c)에서 항상성 조절에 따른 피부상피층 회복 검증 - 피부내 수분손상(TEWL) 감소함. - 피부 CB1/CB2 western blotting을 통한 정량적 변화 확인함. ○ 지방장벽개선효과 - In vitro : HaCaT cell에서 Filaggrin 생성능 확인함. - In vivo : 아토피피부염 동물모델의 피부 각질층에서 Fillagrin 생성 증가함. ○ ECS 조절을 통한 상피내 염증조절 효과 - ESC 조절 : GPR55 활성 증가함. - 항염증효과 : 상피내 연쇄적 면역반응(KLK7 → PAR2 → TSLP) 조절함. ○ 상피내 염증조절에 따른 Th2 Skewed condition 조절 효과 - Th2분화조절 : IL-4분비 감소 → NF-κB 활성 억제함. - 비만세포 활성조절 : Fc ε receptor 활성 차단함 ○ 피부보호관련 상피미세환경 조절 효과 - 세포사이골격에서 Claudin 증가함. 세균보호장벽에서 Cathelicidin 증가함. - 선천면역관여인자인 TLR 증가함. 산성장벽유지관여인자인 NHE 증가함. ○ HPLC를 통한 유효성분 분석 - Berberine, Palmatine, Daidzein, Daidzin, Glycitin 등 증가함. ○ 3Hb에 의한 ECS 활성 증가 - 진피내 CB1, CB2 양성반응 증가함. ○ ECS 조절을 통한 피부 손상조절 효과 - 피부염에 따른 외부형태는 Excoriation된 피부 중심부에서 erythema, hemorrhage 그리고 erosion를, 가장자리 경계부에서는 scarring 등의 극심한 피부염소견 감소함. ○ ECS 조절을 통한 비만세포 활성 조절 - 비만세포 활성 억제 – 탈과립비만세포(luna’s method) 분포감소함. - 소양증(Substance P)와 신경전달물질(serotonin) 활성 차단함. ○ ECS 조절을 통한 대식세포 활성 조절 - 대식세포 활성 감소 – CD68양성반응 감소함. - 염증감소 – p-IkB 활성 조절에 따른 전염증효소 (iNOS) 생성 감소함. ○ Itching관련 뇌지역내 신경세포 활성 조사를 위한 조직화학결과 (Nissil stain) - 대뇌피질내 후방피질과 운동영역에서 하태독법처방처리군의 M2에서 활성신경세포 감소함. - 해마에서 하태독법처방처리군의 CA1, CA2 그리고 치아이랑에서 활성신경세포 감소함. - 숨뇌내 DMV에서 하태독법처방처리군에서 활성신경세포 감소함. - 중뇌내 흑색질에서 하태독법처방처리군에서 활성신경세포 감소함. ○ ECS 조절 기전 구명 - In Vitro : 3Hb의 ECS 조절 확인 - GPR 55 생성 활성 및 FAAH 생성 억제함. - In Vivo : GPR 55 생성 활성 및 FAAH 생성 저해를 면역조 직화적으로 확인함. ○ 한국형 아토피피부염 활용가능성 및 자연보습인자(NMF) 생성조절능 평가 - 한국형 아토피 피부염에 활용 적합 : IL-17과 Ki67 생성 조절함. - NMF 생성 조절능 인정 : Ceramide kinase와 Caspase 14 활성 증가 확인함. ○ 안전성 평가 - 안정성 확보 : 뇌, 간 및 신장에서 조직학적 이상 없음. □ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성) ○ 아토피피부염에 대한 예방 및 치료법 연구의 자료로 활용이 가능함. • CB1/CB2 기전 조절능 확립 • 한국형 아토피피부염 치료제 가치 검증 • 부작용발생 여부를 통한 안전성 확보 • ECS 조절을 통한 진피내 염증조절 가능성 탐색 • ECS 조절을 통한 itching조절 가능성 탐색 • 뇌 부위, 즉, 해마, 보조운동영역, 대뇌섬, 후방피질, 소뇌피질에서 CB 활성 조절을 통한 아토피피부염 소양증 조절 ○ 하태독의 근거창출을 통하여 한의 의료현장에서 예방의료 활동의 근거자료 구축 • 연구결과를 토대로 아토피피부염 치료제로서의 효용 가능성 검증 ○ 예방의학적 근거자료 제시를 통하여 하태독법의 시행이 확산에 기여 • ECS 조절을 통한 진피내 염증조절 가능성 탐색 ○ 연구근거를 활용하여 아토피피부염의 한방 예방의학적 접근의 필요성 구축. ○ 한방 예방의학적 연구방법을 활용한 다양한 소아 질환 연구에 적용 가능성 확보 (출처 : 연구결과 요약문 2p) |
