초록 |
TetO-FUW-OSKM과 FUW-M2rtTA가 함유된 2세대 돼지(Sus scrofa domesticus)의 섬유아세포를 구축한 후, 바이러스를 재감염시킬 필요가 없는 독시사이클린(doxycycline, DOX)이 첨가된 조건에서 세포가 재프로그래밍되도록 유도하였다. 렌티바이러스(Lentiviral) 플라스미드의 테트라사이클린 조절 유전자(tetracycline operator, TetO)-FUW-OSKM와 FUW-M2rtTA를 동시에 돼지 배아 섬유아세포(porcine embryonicfibroblasts, PEF)에 감염시켰을 때, DOX가 첨가된 배양 조건에서 유도 만성 줄기세포(induced pluripotent stem cells, iPSCs)가 형성되었다. 다음으로 배양체(embryoid body, EB)의 형성을 통하여 iPSCs는 유사 섬유아세포, 즉 TetO-PEF 세포로 재분화되었다. TetO-PEF는 TetO-FUW-OSKM과 FUW-M2rtTA 등 2개 벡터를 보유하고 있었으며, 외인성 4인자의 복제 수는 일치하였다. 또한, +DOX 조건에서 4인자의 발현을 조절하였으며, 세포의 재프로그래밍을 직접 추진하였다. 본 연구는 TetO-PEF 세포계를 구축하였으며, 돼지 iPSCs의 배양 조건을 최적화하는데 새로운 세포 자원을 제공하였다. |