| 저자(한글) |
RAO, Yun,PENG, Jie,WU, Hao-peng,CAO, Zhong-wen,LU, Jian-hua,TU, Wei-feng |
| 초록 |
Lipofectamine TM RNAi MAX(Lipo)와의 비교를 통하여, 세포투과성 펩타이드 Tat-LK15가 인간 신장 상피세포(human embryonic kidney 293T cells, 293T)와 쥐 망막신경절세포(retinal ganglion cell line, RGC-5)의 형질전환 소형간섭 RNA(small interference RNA, siRNA)에 대한 효율과 세포 독성을 탐구하였으며, 후기 실험에 근거를 제공하였다. carboxyfluorescein(FAM)으로 표기한 siRNA를 리포터 유전자로 하고, 서로 다른 용량의 Tat-LK15(Tat-LK15 그룹)와 Lipo(Lipo 그룹)를 형질전환 시약으로 하여 각각 293T와 RGC-5 세포를 형질전환시켰다. 형질전환 24시간 후, 형광 현미경으로 FAM 형광 강도를 관찰하고 형질전환 효율을 계산하였으며, CCK-8법으로 세포 독성을 검출하였다. Tat-LK15와 Lipo 용량의 증가에 따라 siRNA 형질전환 효율은 점진적으로 향상하였다. Tat-LK15와 siRNA 분배비율이 2:1(μg/μg)일 때, RGC-5 세포의 형질전환 효율 (87.3±4.5)%은 최고에 도달하였으며, Lipo와 siRNA 분배비율이 5:1(μL/μg)일 때의 최고 형질전환 효율((96.2±3.2)%(P 0.05). 형질전환 시약 용량이 증가함에 따라, Lipo 세포 독성은 뚜렷하게 증가하였고 Tat-LK15 독성은 뚜렷하게 변화하지 않았다. 형질전환 효율이 가장 높을 때, Lipo(5μL) 그룹 내 293T와 RGC-5 세포의 생존율은 [(77.8±4.1)%, (73.4±7.7)%]밖에 되지 않았으며, Tat-LK15(2:1) 그룹 내 같은 종 세포의 생존율[(91.0±3.7)%, (90.0±6.1)%](P Tat-LK15는 siRNA를 효과적으로 형질전환시킬 수 있으며, 세포 독성은 낮고, 안전성은 높았고, 일정한 응용전망을 갖고 있었다. |
