| 저자(한글) |
PAN, Yan-le,WANG, Kai-yu,YANG, Jie,YANG, Lei,LI, Li,GENG, Yi,CHEN, De-fang |
| 초록 |
GenBank 중 Edwardsiella ictaluri의 외부 막 포린 단백질 N(outer membrane porin protein, porin N) 유전자 서열(Gen BankNo: NC_012779.2)에 근거하여 1쌍의 프라이머를 설계하였다. 표적 단편의 크기가 381bp일 것으로 예상한다. 반응 시스템과 반응 조건을 최적화하고 특이성 시험, 민감성 시험 및 인공 감염된 조직 샘플에 대한 검측 시험 등을 통하여 Edwardsiella ictaluri을 신속하게 검출할 수 있는 PCR 방법을 구축하였다. 실험 결과, 검측하여 얻은 Edwardsiella ictaluri, 에드와드시엘라 타르다(Edwardsiella tarda), 아에로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila), 에로모나스소브리아(Aeromonas sobria, Aero), Aeromonas salmonicida, Aeromonas caviae, 스테노트로포모나스(stenotrophomonas), Yersinia ruckeri, Streptococcus iniae, 아시네토박터(Acinetobacter), 대장간균, V.mimicus, P.Fluorescens, Citrobacter freundii 등 15종 세균 가운데 Edwardsiella ictaluri 균만 특이성 밴드를 증폭하였다; 민감성 시험 결과, 해당 방법을 통하여 검출한 최소 핵산량은 9.35×10 -3 ng·μL -1 이었다; 동시에 인공 감염 그룹의 간장, 세균 게놈 DNA, 세균 균액 및 균락(colony)을 증폭하였다. 그 결과 4종 재료에서 모두 크기가 381bp인 유전자 단편을 검측할 수 있었다. 본 연구에서 구축한 방법은 특이성이 강하고 민감도가 높으며, Edwardsiella ictaluri 감염 사례를 신속하고 효과적으로 검측할 수 있다. |
