초록 |
천연수(natural water)에는 동식물 플랑크톤 등 체세포와 free ATP가 존재하며, 세균 ATP 측정에 대해 심하게 간섭할 수 있다. 따라서 체세포와 free ATP의 제거 방법을 탐구하는 것은 생물발광법으로 세균 총수를 측정하는데 필요한 전처리 단계이다. 본 논문에서는 체세포 추출제 Tritonx-100의 최적 농도와 최적 추출 시간, free ATP 가수분해 효소 apyrase의 최적 농도와 세균 ATP 측정에 미치는 영향을 연구하였으며, Tritonx-100과 apyrase 효소를 포함한 체세포 배제 시스템을 실제 천연수의 세균 수 측정에 이용하였다. 연구 결과, 0.4%의 Tritonx-100을 물 샘플에 2분 작용한 후 물 샘플의 체세포를 효과적으로 추출할 수 있었다. Apyrase 효소 농도가 0.2 U에 도달할 때 물 샘플 중의 free ATP를 효과적으로 가수분해할 수 있었다. Apyrase 효소의 가입은 세균에 대해 가수분해 작용이 없었으며, 세균 ATP 측정에 대해 뚜렷한 영향을 미치지 않았다. Tritonx-100과 apyrase 효소를 포함한 체세포 배제 시스템은 체세포를 분해할 수 있으며 세균 ATP 측정에 뚜렷한 영향을 미치지 않는다. 실제 천연수에 응용한 결과, 체세포 배제 시스템은 ATP 생물발광법으로 환경 샘플의 세균 수를 정확하게 측정하는데 조건을 제공하였다. 결과적으로, Tritonx-100과 apyrase 효소 처리 후, 기본적으로 체세포와 free ATP의 간섭을 배제하여 천연수의 실제 세균 총수를 얻을 수 있었다. |