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논문 기본정보
Molecular cloning, preparation of polyclonal antibody and expression detection of Wnt1 in the brain of diapausing and non-diapausing pupae of Helicoverpa armigera(Lepidoptera: Noctuiadae)
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 昆蟲學報 = Acta entomologica Sinica |
| ISSN | 0454-6296, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | CHEN, Wei,XU, Wei-hua |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2015-01-01 |
| 초록 | [목적] Wnt1 단백질은 Wnt/β-catenin 신호경로의 중요한 구성원이다. 본 연구는 왕담배나방(Helicoverpa armigera)의 Wnt1 유전자를 복제한 후 다중 클론 항체를 제조하고 나아가 단백질 수준에서 휴면과 비휴면 번데기 뇌에서 Wnt1 단백질의 발현 상황을 기본적으로 연구하는데 목적이 있다. [기법] RACE 방법을 사용하여 왕담배나방의 Wnt1 유전자를 복제한다. 획득한 서열에 근거하여 Wnt1의 진핵 발현 벡터를 구축하는 한편 세포내 위치를 조사한다. 이와 동시에 원핵 발현 벡터를 구축한 후 대장균(Escherichia coli) BL21(DE3)에서 발현시킨다. 정제 후 토끼를 면역시켜 다중 클론 항체를 제조한다. 마지막으로 Western blot 방법을 사용하여 두가지 발육 상태 번데기 뇌에서 Wnt1 단백질의 발현 상황을 검사한다. [결과] 왕담배나방의 Wnt1 유전자를 성공적으로 복제하였다(GenBank 등록번호: KJ206240). Wnt1은 세포질에 위치하였다. 니켈 컬럼 정제를 통해 순수한 재조합 단백질을 획득하였다. 제조한 Wnt1 항체의 역가는 무려 1:625,000에 도달하였다. Western blot 분석 결과, 휴면 번데기 뇌에서 Wnt1 단백질의 수준은 비휴면 번데기 뇌에 비해 뚜렷하게 낮았다. [결론] 고역가 왕담배나방 Wnt1 다중 클론 항체를 획득하였다. 연구 결과, 휴면 번데기 뇌의 Wnt/β-catenin 경로는 억제되었을 가능성이 큰 것으로 나타났다. 본 연구 결과는 왕담배나방의 발육에서 Wnt/β-catenin 신호경로의 작용을 한층 더 깊이 연구하는데 기초를 마련하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART72385229 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Helicoverpa armigera,Wnt1,diapause,protein purification,polyclonal antibody,왕담배나방,Wnt1,휴면,단백질 정제,다중 클론 항체 |