저자(한글) |
ZHOU, Fa-ting,YIN, Hong-mei,LIU, Shuang-feng,SHEN, Yang,HONG, Jin-yong,XIA, Qing,LIU, Xiao-hang |
초록 |
유체 전단 응력(fluid shear stress)이 후두 편평상피암(laryngeal squamous carcinoma) 세포(Hep2)의 밀착연접에 미치는 영향을 연구하기 위해, Hep2 세포에 1.4 dyn/cm 2 의 유체 전단 응력을 가하여 도립현미경(inverted microscope)으로 서로 다른 시간점 세포의 형태학 변화를 관찰하였다. 투사전자현미경(TEM)으로 전단 응력 하중과 느슨해진 후 세포간 밀착연접(tight junction)의 변화 법칙을 관찰하였다. Western blot으로 밀착연접 단백질(Occludin, Claudin-5와 ZO-1)의 발현을 검출하였다. 공초점 현미경(Confocal Microscopy)으로 Claudin-5 분포 및 발현 상황을 관찰하였다. 관찰 결과, 유체 전단 응력 작용에서 세포 형태는 다각형으로부터 방추형으로 변화하였으며, 역학 자극을 취소한 후 세포는 초기 형태로 회복하는 추세를 보였다. 투사전자현미경으로 관찰한 결과, 전단 응력 하중 시간이 증가함에 따라 세포 사이의 연결은 더 밀접하였다. Western blot 결과, 전단 응력 유도에 의한 밀착연접 단백질 Occludin, Claudin-5와 ZO-1의 발현은 증가하였으며, 전단 응력을 취소한 후 그 발현은 뚜렷하게 감소하였다. 면역 형광 결과, Claudin-5 발현 추세는 Western blot 결과와 일치하였으며, 정지 상태일 때 Claudin-5는 kytoplasm에 균일하게 분포되었으며, 전단 응력 로딩 후 그 분포는 쉽게 세포 사이에 위치할 수 있어 역학 자극을 취소한 후 세포 사이와 kytoplasm 구역에 여전히 Claudin-5는 발현된다. 따라서 전단 응력은 Hep2 세포 형태를 변화시킬 수 있으며, Occludin, Claudin-5와 ZO-1 단백질을 상향조절하여 세포 사이의 밀착연접을 증가시킬 수 있다. |