| 초록 |
녹용(deer antler)은 현재 유일하게 완전히 재생될 수 있는 포유동물의 소속 기관이다. 이러한 재생은 녹용 재생 줄기세포에 기반한다. 본 연구에서는 꽃사슴(Cervus nippon)의 녹용 재생 줄기세포를 샘플로 하고, 처리기법, 염색기법, 단백질 정제와 등전기 초점화 등 4가지 조건에서 단백질체의 2차원 전기영동을 최적화하였다. 연구 결과, Bullet Blender 세포조직 파쇄기를 이용하여 처리한 세포가 초음파 파쇄에 비해 양호하였다. 이중염색법으로 염색하여 더 많고 더 뚜렷한 단백질 포인트를 얻을 수 있었다. 등전기 초점화의 총 volt-hours이 15,000 volt-hours일 때, 세로줄 무늬가 상대적으로 적었다. 6가지 다양한 단백질 추출기법과 정제기법 조합을 비교한 결과, 자체 제작한 용해물과 2차원 전기영동 정제 키트를 결합하는 기법을 이용하여 얻은 전기영동도가 비교적 양호하였다. 종합 최적화 후의 2차원 전기영동 기술을 통하여 얻은 단백질 맵의 단백질 포인트가 상대적으로 많고 매끈하였고, 줄무늬 현상이 미약하고 반복성이 비교적 양호하였으며, 후속 소프트웨어 분석 및 데이터 처리 요구를 만족시켰다. 본 연구는 다양한 발육기의 꽃사슴 재생 줄기세포에 관한 비교 단백질체학적 연구를 위하여 기초 실험 데이터를 제공하였다. |
