저자(한글) |
MA, Hong-chuang,BAI, He,ZHANG, Zhe,ZHAO, Bing-hai,CAO, Ya-nan,LI, Hong-zhi,LIU, Jie-ting,ZHANG, Chun-lei,FENG, Biao,CHU, Yan-hui |
초록 |
목적: 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질이 간섬유화(Liver fibrosis) 쥐에 대한 치료 작용을 연구하려는 것이다. 방법: 재조합 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 벡터를 함유한 대장간균 BL21을 실험 대상으로 하고 배양과 번식, 유도, 정제 과정을 통하여 재조합 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질을 얻었다. CCl 4 유도 기법으로 간섬유화 쥐 모델을 제조하고, 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질이 쥐의 간섬유화에 미치는 영향을 관찰하였다. SDS-PAGE 기법을 통하여 정제된 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질을 검측하였다. 생화학법으로 혈청 중 글루탐산-피루브산아미노기전달효소(glutamic pyruvic transaminase, ALT) 및 글루탐산 옥살아세트산 아미노전이효소(glutamic oxalacetic transaminase, AST)의 함량을 검측하였다. 실시간 형광정량 PCR(real-time PCR) 방법과 면역형광방법을 사용하여 각 그룹 쥐의 간 조직에서 α 평활근 액틴(alpha-smooth muscle actin, α-SMA), 1형 콜라겐(collagen1, Col1)과 4형 콜라겐(collagen4, Col4)의 발현 상황을 검측하였다. HE, MASSON, PAS 등 3종 병리학 염색법을 사용하여 각 그룹 쥐의 간섬유화 변화를 관찰하였다. 결과: SDS-PAGE 검측 결과, 정제 후에 고순도의 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질을 얻을 수 있었다. 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질의 치료 그룹은 혈청 중 ALT와 AST의 함량을 감소시킬 수 있었다. 절단형 TGF-βⅡ 수용체 단백질의 치료 그룹은 간 조직의 α-SMA, FN, Col1과 Col4의 mRNA 및 단백질의 발현 수준을 낮출 수 있다. 3종 병리학 염색법으로 검측한 결과, 간섬유화 쥐의 모델과 비교했을 때, 치료 그룹 쥐의 섬유화 정도가 뚜렷하게 감소하였다. 결론: 재조합 절단형 TGF-βⅡ형 수용체 단백질이 쥐의 간섬유화 정도를 억제하는 작용이 있다. 이 결론은 간섬유화 및 기타 섬유화 질환을 치료하는데 잠재적인 치료 수단을 제공한다. |