| 저자(한글) |
WU, Sheng-nan,LIU, Da-wei,LIU, Yi,HU, Bao-qing,ZHANG, Jian-qiang,WANG, Yan,WANG, Ting |
| 초록 |
본 논문은 3' RACE 기술로 전사체에 대하여 고속 대량 서열 측정하여 얻은 날개조개(Hyriopsis cumingii) HSP60 유전자(hcHSP60) 긴 단편(2,629 bp)의 3' 말단을 클론한 후 hcHSP60 cDNA의 전체 길이 서열과 결합시켰다. 여러가지 분자생물학적 소프트웨어로 hcHSP60 cDNA의 전체 길이 서열 특성을 분석하였으며, 또한 역전사 중합효소 연쇄반응(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR) 기술로 hcHSP60 cDNA의 조직에서 나타나는 분포 그리고 고온 및 저온 스트레스 처리를 진행한 후 발현 변화를 검사하였다. 연구 결과, hcHSP60 cDNA의 전체 길이는 2,807 bp이었다. 그 가운데서 개방형 해독틀(open reading frame)의 길이는 1,707 bp이었고, 568개 아니노산을 코딩하였으며, 예측한 분자량 크기는 61.04 ku이었고, pH 7.0일 때 이론 등전점(theoretical isoelectric point)은 5.63이었다. 서열에는 신호 펩타이드(signal peptide)와 막관통 구조(transmembrane structure)가 없었다. 아미노산 서열 보존성을 분석한 결과, hcHSP60 아미노산 서열은 만손주혈흡충(Biomphalaria glabrata)의 HSP60와 상동성이 가장 높았고(82%), 넙치(Paralichthys olivaceus), Tanichthys albonubes의 HSP60와 상동성이 가장 낮았다(75%). RT-PCR 검사 결과, hcHSP60는 간췌장(hepatopancreas)에서 발현량이 가장 높았고, 혈액에서 발현량이 가장 낮았다. 30℃와 35℃의 수온(water temperature)으로 날개조개를 4시간 처리한 후 각 조직에서 hcHSP60의 발현 수준은 뚜렷하게 증가되었다. 이것은 hcHSP60는 날개조개가 열 스트레스 저항 반응 과정에서 중요한 작용을 일으킨다는 것을 설명한다. |
