Rescuing Bombyx mori bidensovirus in BmN cells in vitro
기관명 | NDSL |
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저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
ISSN | 1000-3061, |
ISBN |
저자(한글) | ZHANG, Miao-miao,MA, Ying,PAN, Xiao-li,HU, Chao-yang,LI, Guo-hui,SI, Ya-yun,XING, Ya-li,CHEN, Ke-ping,YAO, Qin |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2015-01-01 |
초록 | 농핵병 바이러스(Bombyx mori bidensovirus, BmBDV)는 특이적으로 누에 중장(midgut)을 감염시켜 만성 농핵병을 야기시키는 병원균이다. 게놈에 2개 세트의 단일 사슬 DNA분자(VD1과 VD2)가 함유되어 있는데, 아직 그 복제 메커니즘이 알려지지 않았다. 체외에서 감염성 바이러스 입자를 구제하기 위해, BmBDV 게놈의 전체 길이를 가진 클론 플라스미드 pMD 18T-VD1와 pUC-VD2를 구축하였다. 동시에 효소 절단을 통하여 구축한 클론 플라스미드로 이중 사슬의 게놈 단편 VD1과 VD2를 얻었다. 그리고 지질체의 포매법(Entrapment)을 이용하여 BmN 세포의 선형화 동시 전이(linear co-transfect)를 수행하였다. 전이 후 BmN 세포의 총 DNA를 추출하고 메틸화 처리를 수행하였다. 그리고 PCR을 통하여 바이러스 유전자 복제를 검출하였다; 전이 후 BmN 세포와 먹이에 의해 감염된 누에 중장의 총 단백질을 추출하고, 단백질 웨스턴 블롯 검측법으로 각각 검측하여 바이러스 유전자의 발현을 검출하였다. 해당 바이러스 선형화의 유전자 단편에 대한 BmN 세포의 공동 전이를 통하여 체외 감염성 바이러스 입자에 대한 구제를 실현할 수 있다는 점을 최초로 표명하였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART72513942 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | BmBDV,viral genome fragments,linear co-transfect,BmN cells,virus rescue,BmBDV,바이러스 유전자 단편,선형화 동시 전이,BmN 세포,바이러스 구제 |