저자(한글) |
JIA, Cui-cui,JI, Jing,WANG, Gang,TIAN, Xiao-wei,DU, Xi-long,GUAN, Chun-feng,JIN, Chao,WU, Dian-yun |
초록 |
산업 발전과 토양 오염이 점점 심각해짐에 따라, 유전자 공학을 이용한 토양 회복 기술이 점차 사람들의 관심을 보이기 시작했다. 그러므로 중금속 반응의 제한효소 유전자를 개발하는 것은 식물을 이용한 토양 회복에 활용 가능한 유전 자원을 제공할 수 있다. RT-PCR 및 말단 클로닝 방법을 통하여 구기자의 글루타티온 합성효소(Lycium chinense, Glutathione synthetase, LcGS) 유전자를 획득하고, 반정량 RT-PCR 방법을 사용하여, 서로 다른 시간때에 나타나는 구기자 LcGS의 암모늄(Cd)의 발현량 변화를 분석하였다. 그 결과, LcGS 발현량이 스트레스를 받는 시간이 길어짐에 따라 증가하였고, 스트레스를 받기 시작하여 9시간, 12시간과 24시간 지났을 때 비교적 높은 수준을 유지하였다. 동시에 식물의 이중원소 발현 벡터 pCAMBIA2300-LcGS를 구축하고, 아그로 박테리움(Agrobacterium) 유도 방법을 사용하여 LcGS 유전자를 담배에 형질전환시켰다. 그리고 PCR을 이용하여 LcGS 유전자를 담배의 게놈에 통합시켰다. Cd 처리 조건에서 형질전환 식물주의 글로타티온(glutathione,GSH), 식물 파이토킬레틴(phytochelatins, PCs)와 엽록소 함량 비율이 대조 그룹보다 훨씬 높았다. 즉 형질전환 식물주가 중금속 스트레스에 대한 저항성이 대조그룹보다 더욱 강했다. 그러므로 GS 식물의 과발현은 중금속의 오염을 회복하는 효과적인 방법이다. |