| 저자(한글) |
SHEN, Shu-xia,ZHU, Yun-ming,MIN, Wei-hong,FANG, Li,XU, Jin-kun |
| 저자(영문) |
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| 소속기관 |
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| 소속기관(영문) |
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| 출판인 |
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| 간행물 번호 |
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| 발행연도 |
2014-01-01 |
| 초록 |
【목적】Corynebacterium pekinense 내 호모세린 탈수소효소(homoserine dehydrogenase, HSD)의 공간 구조를 개선하여 양호한 기능을 갖는 새로운 효소를 얻는다. 【방법】위치지정 돌연변이(site directed mutagenesis) 기술을 이용하여 HSD 더블 돌연변이체(double mutant) L200F/D215A, L200F/D215E, L200F/D215G, L200F/D215K을 구축한 후, 이를 대장균 E. coli BL21에 도입시켜 고효율 발현을 진행하였으며, 촉매 효율이 가장 높은 더블 돌연변이체 L200F/D215K와 더블 돌연변이 전의 L200F를 선택하여 동역학적 및 효소학적 성질을 비교하였다. 【결과】HSD 더블 돌연변이체 L200F/D215K의 V max 는 36.92 U/mg로서 L200F보다 1.24배 향상되었다. 최적의 반응 온도는 37℃로서 L200F에 비해 2℃ 향상되었다. 최적의 반응 pH는 7.5로서 L200F의 경험적 가치와 같았다. 최적의 온도조건에서 반감기(half-life period)는 4.16 h로서 L200F에 비해 1.12배 향상되었다. L200F/D215K과 L200F는 유기용제와 금속이온에 대한 양호한 저항성을 나타냈다. 【결론】HSD는 공간 구조를 개선하여 활성을 향상시키고 효소학적 성질을 최적화하였다. 본 연구는 HSD 돌연변이체의 효소학적 성질을 인식하는데 도움이 되며, 새로운 효소를 연구 개발하는 데 강력한 근거를 제공한다. |
| 원문URL |
http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART74119425 |
| 첨부파일 |
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