| 저자(한글) |
YU, Tao,HU, Die,WU, Min-chen,WANG, Jun-qing,FENG, Feng,GU, Ying |
| 저자(영문) |
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| 소속기관 |
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| 소속기관(영문) |
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| 출판인 |
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| 간행물 번호 |
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| 발행연도 |
2014-01-01 |
| 초록 |
바이오 촉매 산화 환원 반응 내 보효소 순환(coenzyme cycle) 문제를 해결하기 위해, 인공 합성 코돈으로 최적화한 후의 Thermoplasm aacidophilum 포도당 탈수소효소 유전자 Sygdh를 E. coliBL21 (DE3)에서 발현시키고, 조효소액(crude enzyme solution)을 니켈 갈럼 친화 크로마토그래피(nickel column affinity chromatography)로 정제하여 재조합 포도당 탈수소효소 SyGDH를 얻었다. SDS-PAGE 분석 결과, 상대적인 분자 질량이 41.0 kDa이었다. 효소학 성질 분석 결과: 효소의 최적 pH 값이 7.5, pH 6.0~8.0일 때 효소 활성이 안정적이었다; 최적 반응 온도가 40℃이고, 55℃ 이하일 때, 효소 활성이안정적이었다; 최적 조건에서 효소 비활성이 4.5 U/mg에 달했다; Zn 2+ 가 효소에 대해 뚜렷한 활성화 작용을 보였다; 효소가 NADP + 에 대한 친화력은 NAD + 에 대한 친화력보다 컸고, 대부분 유기용제에 대해 양호한 내수성을 보였다; D-포도당에 대한 K m 과 V max 값이 각각 28.2 mmol/L와 6.5 U/mg이었다. 포도당 탈수소효소와 환원효소 결합을 통하여 구축된 NADPH 보효소 순환 시스템 중, 4-chloro-3-oxobutanoate ethyl ester(COBE)를 기질로 사용했을 때, 카르보닐기 환원효소(Carbonyl reductase) 촉매화 산물 4-염소-3-히드록시부티르산(4-chloro-3-hydroxybutyrate)의 수율이 99.0%로서 포도당 탈수소효소를 첨가하지 않은 생성물 수율의 3.11배 였다. 이는 재조합 SyGDH이 바이오 촉매화 산화 환원 반응에 보조효소 NADPH 재생 능력을 제공하는 작용이 있다는 것을 설명한다. |
| 원문URL |
http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75839753 |
| 첨부파일 |
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