| 저자(한글) |
Cong, Shan,Wang, Rui,Hao, Fei,Wen, Jianxun,Bi, Zhaowei,Nuo, Mingtu,Liu, Dongjun |
| 초록 |
소 배아 줄기 세포 성장에 적합한 배양 보조 세포층을 찾아 소 배아 줄기 세포를 성공적으로 육성하는 것은 중요한 의의를 가지고 있다. 본 연구에서는 서로 다른 농도의 국산 미토마이신으로 처리한 SIM 생쥐(Mus musculus) 섬유 세포 티오구아닌 저항과 우아바인 저항계(STO세포)를 배양 보조 세포층으로 하여 소 배아 줄기 세포를 배양함으로써 소 배아 줄기 세포 배양계의 구축에 실험적 토대를 제공하고자 한다. 10, 15, 20, 30과 40 mu;g/mL 국산 미토마이신을 이용하여 각각 1.5, 3.0과 4.0h의 STO세포를 처리하였다. 형태학적으로 서로 다른 세대간의 STO세포 성장 상태를 관찰하였고, STO세포를 배양 보조 세포층으로 하여 성장하는 소 배아 줄기 세포에 대해 알칼리성 포스파타아제 착색(AKP), 발생단계 특이적 태아성 세포 표면 항원-4(OCT-4)와 발생단계 특이적 태아성 항원-1(SSEA-1) 면역 조직화학적 검출, 체외 분화 배양체 등에 대한 실험을 진행하였다. 그 결과, 15 mu;g/mL 농도의 미토마이신으로 3.0h 처리했을때 세포 분열을 유효하게 억제할 수 있음을 알 수 있다. STO세포는 5~10 세대를 배양 보조 세포층으로 한 세포 형태가 가장 우수하였고, 또한 획득된 소 배아 줄기 세포 AKP 착색 및 OCT-4와 SSEA-1 항원 발현은 모두 양성을 나타냈으며 각각 체외 분화 배양에서 배양체를 형성하였다. 결론적으로 국산 미토마이신을 이용하면 STO세포를 효과적으로 처리할 수 있고 또 STO세포를 배양 보조 세포층으로 배양한 소 배아 줄기 세포가 미분화 상태를 유지할수 있으며 기존의 배양 보조 세포층으로서 소 배아 줄기 세포를 배양할 수 있음을 증명하였다. |
