저자(한글) |
PENG, Hui-zhen,LIU, Min,LIU, Qiao-lin,XIAO, Diao-yi,SU, Jian-ming,XU, Bao-hong,LIU, Yu-jie |
초록 |
본 논문은 눈불개(Squaliobarbus curriculus)의 Mx 단백질(Myxovirus resistance protein) 기능을 연구하기 위해 간단한 PCR 방법 및 SMART RACE 방법으로 눈불개 비장(spleen)에서 Mx 유전자의 전체 길이 cDNA를 클론하였다. 그리고 생물정보학적 방법으로 클론하여 얻은 cDNA의 상동성(homology)을 분석하였으며, 실시간 형광 정량 PCR(RT-qPCR) 방법을 이용하여 cDNA가 비장, 간(liver), 창자(intestine), 신장(kidney) 등 9개 조직에서 발현 및 초어 레오바이러스(Reovirus of Grass carp) GCRV-104에 감염된 후 서로 다른 시간에 눈불개 Mx 유전자의 시공간 발현 규칙을 검사하였다. 연구 결과, 눈불개 Mx 유전자의 cDNA 서열(ScMx) 전체 길이는 2,325 bp였는데 그 가운데는 5'-UTR 40 bp, 3'-UTR 371 bp와 ORF 1,884 bp가 포함되었고, 모두 627개 아미노산을 코딩하였으며, 해당 cDNA가 코딩하는 Mx 단백질의 분자량은 약 70.9 kD이고, 이론 등전점 pI는 8.25였으며, 척추동물(vertebrate)의 Mx 단백질에 공동으로 존재하는 구조 특성이 있었다. 눈불개 Mx와 붕어 Mx3의 상동성은 가장 높았으며, Mx는 눈불개의 비장, 간, 창자, 신장 등 9개 조직에서 모두 발현하였는데 그 가운데서 간 조직의 상대 발현량이 가장 높았고, 비장에서 그 다음으로 높았으며, 창자에서 발현량이 가장 낮았다. GCRV-104 바이러스로 감염시킨 후 ScMx는 간과 비장 조직에서 발현량이 뚜렷하게 증가하였고, 48시간 되었을 때 발현량이 최대치에 도달하였는데 각각 대조 그룹의 10배(간)와 5배(비장)였으며, 또한 해당 간과 비장 조직에서 발현 패턴은 유사한 것으로서 모두 처음에 증가하고 나중에 감소하는 파동형 변화 추세였다. 연구 결과, ScMx는 눈불개의 GCRV-104 바이러스 저항성 면역 반응에 참여하는 것으로 나타났다. |