| 저자(한글) |
LI, Zhong-sheng,CHEN, Yi-wen,BAI, Ai-quan,CHEN, Shan-zhen,WANG, Lu-lu,YAO, Huo-chun,WANG, Gui-ping |
| 초록 |
【목적】TTSuV2(Torque teno sus virus 2) 바이러스 단백질의 돼지 혈청에 대한 면역학적 반응을 이해하고 TTSuV2 ORF1에 의해 코딩된 아미노산 서열의 특정된 조각의 면역원성을 규명하여 TTSuV2의 면역학적 진단법을 구축하는데 실험적 근거를 제공하고자 한다. 【방법】본 실험실에서 시퀀싱한 TTSuV2 바이러스를 연구대상으로, 대장균 발현 시스템에서 클로닝을 진행하여 TTSuV2 ORF1 유전자에서 두 개의 서로 중첩되는 유전자 조각을 발현시키고 발현 산물을 정제한 후, 두 개의 재조합 단백질(TTSuV2 ORF1a과 TTSuV2 ORF1ab)이 돼지 혈청 항체에 대한 면역학적 반응을 분석하였다. 【결과】tag 항체를 이용하여 Western Blotting 분석을 진행한 결과, 재조합 TTSuV2 ORF1a과 TTSuV2 ORF1ab 단백질이 성공적으로 발현되었다는 것을 발견하였다. 구축한 ELISA법을 이용하여 212본 돼지 혈청을 검사한 결과, 179개 아미노산을 갖춘 재조합 TTSuV2 ORF1a과 416개 아미노산을 갖춘 재조합 TTSuV2 ORF1ab 단백질 사이에 뚜렷한 상관관계가 존재하였으며, 돼지 혈청에 대한 양자의 반응이 거의 일치하였다. 돼지 혈청을 이용하여 Western Blotting 분석을 진행한 결과, 혈청 항체는 두 재조합 단백질을 특이적으로 식별할 수 있었다. 【결론】TTSuV2 ORF1a과 TTSuV2 ORF1ab의 서로 중첩된 179개 아미노산 서열(168-346)에 TTSuV2 ORF1의 핵심 B세포 항원결정부위(epitope)가 포함되었으며, 재조합 단백질 TTSuV2 ORF1a는 TTSuV2 혈청 항체의 면역학적 진단에 적용할 수 있었다. |
