| 저자(한글) |
DAN, Xi-shuang,YUE, Hua-mei,CHEN, Xi-hua,YE, Huan,YANG, Xiao-ge,LI, Chuang-ju |
| 초록 |
본 논문은 칼상어(Acipenser dabryanus) 성장 호르몬(growth Hormone, GH) 유전자의 기능을 연구하기 위해, 칼상어 뇌하수체(pituitary)의 SMART cDNA를 합성한 후 클론하여 GH 전체 길이 cDNA 서열을 얻었다. 칼상어의 GH 전체 길이 cDNA 서열은 1,008 bp인 것으로서 52 bp인 5' 말단 비코딩 영역(untranslated region, UTR), 214 개의 아미노산을 코딩하는 645 bp인 개방형 해독틀(open reading frame, ORF) 및 311 bp인 3'UTR로 구성되었다. GH 아미노산 서열로 계통수(phylogenic tree)를 구축하여 분석한 결과, 칼상어는 양서류, 파충류 및 포유류와의 일치성이 경골어류(bony fish)에 비하여 높았다. 실시간 형광 정량 PCR 분석을 진행한 결과, 칼상어 GH mRNA는 주로 뇌하수체와 시상하부(hypothalamus)에서 발현되었고, 뇌하수체에서 GH의 발현량이 시상하부에서 발현량의 약 110배였다. 웨스턴 블롯(Western-blot) 연구 결과와 qRT-PCR 분석 결과는 일치하였는데 오직 뇌하수체와 시상하부에서 성장 호르몬 단백질이 검출되었고, 뇌하수체에서 GH의 발현량이 시상하부에 비하여 뚜렷하게 높았다. 면역 형광 위치결정 분석(immunofluoresence localization) 결과, GH는 주로 뇌하수체 중간 부위에 위치하여 있었고, 시상하부에서도 소량의 형광 신호가 검출되었다. 헤마톡실린-에오신 조직 절편 염색(hematoxylin eosin tissue slice staining) 연구를 진행한 결과, GH는 주로 호산성(acidophilia)인 성장 호르몬 분비 세포에서 분비되었다. 연구 결과, 척추 동물의 성장 호르몬 유전자 진화 그리고 인공 양식 과정에서 칼상어의 성장 조절을 심층적으로 연구하는데 기초를 제공하였다. |
