| 초록 |
본 논문에서는 고속액체 크로마토그래피-이중질량분석법(High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)을 이용하여 복어 간(fugu liver) 테트로도톡신(Tetrodotoxin, TTX) 함량의 신속한 검출에 대한 연구를 진행하였다. 복어 간 샘플에 대하여 1% 초산-메탄올 용액으로 2차례 초음파 추출하였고 노멀 헥산(normal hexane)으로 탈질 후, C 18 과 흑연화 카본 블랙(graphitized carbon black, GCB) 혼합 흡착제로 청정화하였고 동결 고속 원심분리시켰다. 또한 폴리테트라플루오르에틸렌-나이론 막(Polytetrafluoroethylene-nylon membrane)을 이용하여 상청액을 여과하였다. TSK-gel Amide-80 3 μm 크로마토그래픽 칼럼(chromatographic column)으로 분리하였으며, 아세토나이트릴(acetonitrile)과 0.15% 아세트산(acetic acid)[10 mmol/L 아세트산암모늄(ammonium acetate) 포함]의 용액을 이동상(mobile phases)으로 하여 기울기 용리(gradient elution)를 진행하였다. 이러한 단계를 통하여 HPLC-MS/MS 분석을 진행하였다. 또한, 외부표준법(external standard method)을 사용하여 정량하였다. 이 방법의 검출 한계는 40μg/kg이고 50~1,000μg/kg 범위 내에서 선형 관계가 우수하였다. 복어 간에서 각각 50, 75, 100μg/kg TTX를 첨가하여 반복성 시험을 진행한 후, 회수율은 79.2%~105.3% 사이에 있고 상대 표준 편차(RSD)는 9.0%보다 크지 않았다(n=6). 해당 방법은 정확하고 감도가 좋으며, 실용성이 있고 시약과 시간을 절약하며, 조작이 간단하고 재현성이 우수하였다. 이 방법은 기존에 복어 간의 TTX 함량을 신속하고 정량적으로 검출해야 하는 기술적 요구를 만족시킬 수 있다. |
