| 초록 |
병원성 아에로모나스 하이드로필라(Aeromonas hydrophila)에 인공 감염된 중국 자라(Trionyx sinensis)의 심장, 간장, 비장, 신장을 재료로 하고 SMART 기술(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)을 이용하여 아에로모나스 하이드로필라 감염 조직의 cDNA 라이브러리를 구축하였다. 획득한 cDNA 단편을 PGEM-T 벡터에 연결한 다음, 전기 충격으로 대장균 DH5α 내에 형질주입하였다. PCR 양성 검사 결과는 주입 조각이 0.5~2 kb 사이에 있는 것으로 나타났다. 해당 라이브러리 내에는 4.3×10 5 개의 재조합체를 함유하고 재조합 효율은 92%이었다. 본 실험은 164개 1000 bp 이상의 조각을 분석하고 감정하였고, 39개의 서열은 중국 자라에서 처음으로 발견되었으며 감정된 유전자는 11개의 면역 유전자, 6개의 신호 전달 유전자, 15개의 촉매 유전자, 3개의 수송 관련 유전자, 7개의 구조 유전자 및 9개의 미지 유전자를 포함하였다. 본 실험 라이브러리의 성공적인 구축은 중국 자라 생체의 세균 감염과 관련된 면역 유전자를 감정할 뿐만 아니라 면역학, 계통 발육 및 병원체와 생체의 상호작용을 깊이 있게 연구하는데 튼튼한 기초를 마련하였다. |
