저자(한글) |
LIU, Ying-juan,SHEN, Yu-jin,DU, Jin-liang,CAO, Li-ping,JIA, Rui,YIN, Guo-jun |
초록 |
화학성 간세포 손상에 대한 퀘르세틴(quercetin, QC)의 보호작용을 연구하고자 한다. 본 실험실에서는 DPPH[1,6-Bis(diphenylphosphino) hexane]을 이용하여 퀘르세틴의 라디칼 제거 능력을 측정하였다. 8 mmol/L의 사염화탄소(CCl 4 )를 체외 유도제로 이용하여, Cyprinus carpiovar Jian의 간세포 손상 모델을 구축하였다. 1차 배양한 간세포를 각각 다양한 농도의 퀘르세틴(0.05, 0.1, 0.2 mg/mL)으로 전처리, 후처리 및 전후 처리를 진행하여, 배양 상청액의 지표효소[아스파르트산염 아미노기전이효소(aspartate transaminase, GOT), 알라닌 아미노기전이효소(alanine transaminase, GPT), 젖산 탈수소효소(lactate dehydrogenase, LDH), 및 과산화물 제거효소(superoxide dismutase, SOD)]의 활성 및 말론디알데히드(malondialdehyde, MDA)의 방출량을 검출하였으며, 실시간 형광 정량 PCR(Real-time quantitative PCR, qRT-PCR) 기법을 이용하여 세포 내 시토크롬 P450 1A(CYP1A), 3A(CYP3A) 및 인터류킨-1β(IL-1β), 인터류킨-6(IL-6) 및 유도성 산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)의 mRNA 발현량을 측정하였고, Westem blot을 이용하여 핵 전사인자-κB(NF-κB)의 구성원 c-Rel과 p65의 단백질 발현량을 측정하였다. 연구 결과, 저농도의 QC은 DPPH를 효과적으로 제거할 수 있었는데, 이는 QC가 비교적 강한 라디칼 제거 능력을 갖고 있다는 것을 설명한다. QC는 세포의 활성 및 SOD 활성을 뚜렷하게 향상시킬 수 있었으며, GOT, GPT, LDH, MDA의 함량을 효과적으로 감소시킬 수 있었다. 동시에, QC는 또 CYP1A과 CYP3A의 발현을 뚜렷하게 억제하였으며, c-Rel과 p65 및 하위 세포인자의 전사도 뚜렷하게 억제하였다. 데이터 통계 분석을 통하여, 전처리 그룹의 효과가 가장 양호하고, 그 다음으로 전후 처리그룹이며, 후처리 그룹이 최악이라는 것을 알 수 있었으며, 각 그룹 중 0.1과 0.2 mg/mL 퀘르세틴의 억제 효과가 가장 뚜렷하였다. 상기 결과를 종합한 결과, QC는 Cyprinus carpiovar Jian의 화학성 간손상에 일정한 보호작용을 하였다. 그러므로 실제 생산에서 퀘르세틴을 사료 첨가제로 개발하여 수산동물의 병저항성을 향상시킬 수 있다. |