| 저자(한글) |
LI, Jing-hui,MENG, Yu,LI, Yu-heng,LI, Chang-sheng,YANG, Huan-min,LI, Shi-ze |
| 초록 |
저온 유도 RNA 결합 단백질(Cold inducible RNA-binding protein, CIRP)을 보유한 과발현 벡터를 구축하고자, 우선 4℃ 조건에서 8시간 저온 처리를 거친 SD 쥐의 고환 조직으로부터 CIRP 유전자의 cDNA 서열을 얻고, 다음 CIRP 유전자의 코딩영역을 증폭하여 이를 진핵 발현벡터 pLenti6/V5에 복제한 후 효소절단 감정 및 시퀀싱을 진행하였다. 성공적으로 복제한 플라스미드를 HEK293T 세포에 감염시킨 후 Western blot으로 CIRP의 발현 수준을 검출하였다. CIRP 코딩영역을 성공적으로 증폭한 후, 이를 벡터 pLenti6/V5에 복제하였다. CIRP 과발현 벡터를 HEK293T 세포에 감염시킨 후 Western blot으로 검출한 결과, CIRP 단백질의 발현 수준은 뚜렷하게 증가하였다(P 본 연구는 CIRP 과발현 벡터를 성공적으로 구축하였으며, CIRP의 작용 메커니즘을 한층 더 연구하는데 기초적 도구를 제공하였다. |
