저자(한글) |
LU, Li-hui,ZHAO, Ming-yue,WU, Si-yuan,WU, Wen-chao,FU, Hua,LIU, Xiao-jing |
초록 |
본 연구의 목적은 네크롭토시스(necroptosis) 중 핵심 키나아제 유전자 ripk1과 ripk3의 발현이 대응된 shRNA 플라스미드에 의해 침묵된 후, 저산소증/재산소화(H/R)에 의해 유도된 심근세포 손상에 대한 보호 작용을 관찰하는 것이다. DNA 재조합 기술을 이용하여 설계하여 합성한 shRNA 서열을 pSUPER 플라스미드에 삽입한 후 RIPK1-shRNA 및 RIPK3-shRNA 발현 플라스미드를 구축하였다. 상술한 플라스미드를 H9c2 심근세포에 형질전환한 다음 H/R 처리를 진행하였고, 다시 RT-PCR과 Western blot 방법으로 상응 유전자의 발현 상황을 연구하였으며, 네크롭토시스 및 심근 손상의 관련 지표를 검출하였다. 실험 결과, 유전자 ripk1과 ripk3의 발현은 특이한 shRNA에 의해 억제된 후, H/R에 의해 유도된 H9c2 심근세포에 대해 뚜렷한 보호작용을 하였다. |