| 저자(한글) |
ZHI, Tong-rui,SONG, Xiao-ling,ZHANG, Xiao-jing,ZHANG, Sheng-jing,HUANG, Jian |
| 초록 |
대하(shrimp) 체내에서 분리한 균주에서 바실러스 셀레우스균(Bacillus cereus)과 비브리오 알기놀리티쿠스(Vibrio alginolyticus)을 신속하게 선별하고자, 바실러스 셀레우스균과 비브리오 알기놀리티쿠스를 항원으로, SPF 뉴질랜드 흰토끼(New Zealand White rabbit)를 면역시켜 면역 혈청을 얻었는데, 그 역가(titer)는 모두 1:2,000보다 높았다. 면역 토끼의 혈청을 일차 항체로, HRP-양의 항토끼(goat anti-rabbit) 혈청을 이차 항체로 하여, 바실러스 셀레우스균과 비브리오 알기놀리티쿠스의 신속한 검출을 위한 간접 ELISA기법을 구축하였다. 해당 기법에서 토끼 항혈청의 최적의 희석도는 1:10,000, 균액의 최적의 피막 농도(coated concentration)는 10 6 CFU/ml였다. HRP-양 항토끼 혈청의 최적의 희석 농도는 1:1,000, 검출 가능한 세균의 최저 농도는 10 4 CFU/ml였다. 항바실러스 셀레우스균 혈청과 항비브리오 알기놀리티쿠스 사이에는 교차 반응이 존재하였으나, 항비브리오 알기놀리티쿠스 혈청과 유연관계가 비슷한 균주 사이에는 교차 반응이 존재하지 않고 비교적 강한 특이성이 존재하였다. 2012년과 2013년에 각각 얼룩새우(Penaeus monodon), 대하(Fenneropenaeus chinensis), 흰다리새우(Litopenaeus vannamei) 등 9개 집단의 샘플에서 분리, 정제하여 109주의 해양 세균을 얻었으며, 구축한 다중 내성 간접 ELISA기법을 이용하여 그 일부 균주를 신속하게 검출하여 총 6주의 비브리오 알기놀리티쿠스를 검출했으나, 바실러스 셀레우스균는 검출되지 않았다. |
