| 저자(한글) |
LI, Tian-sen,ZHANG, Hui,ZHANG, Yan,MENG, Ru,ZHANG, Yu,SUN, Zhi-hua,JIANG, Pan-wen,WANG, Zhen,CHEN, Rui-hua,CHEN, Chuang-fu |
| 초록 |
자연감염(natural infection)과 백신면역을 구분할 수 있고, 또한 독성이 약한 브루셀라균(Brucella melitensis) 후보 백신 균주를 얻기 위해서, 본 실험은 포스포글루코무타아제 유전자(phosphoglucomutase gene, pgm)가 브루셀라균 M5-90 백신 균주의 독성에 미치는 영향을 연구하고, 또한 pgm에 대하여 면역기능 평가(immune evaluation)를 진행하였다. 본 실험에서는 재조합 플라스미드 pGEM-7zf- Delta;pgm를 구축하였으며, 또한 전기천공법(electroporation)으로 브루셀라균 M5-90 감수성 세포(competent cells)를 형질전환시킨 후 브루셀라균 백신 균주 M5-90의 pgm 유전자 결손 균주( Delta;pgm)를 선별하여 얻었다. 그리고 선별하여 얻은 M5-90 Delta;pgm 균주에 대하여 유전 안정성(genetic stability)과 면역원성(immunogenicity) 검사를 진행하였다. 연구 결과, Delta;pgm는 안정하게 15대까지 유전될 수 있고, 또한 Delta;pgm 그룹의 항체 함량은 친균주(parent strain) M5-90 그룹에 비하여 차이가 뚜렷하지 않았으며, Delta;pgm가 균주를 유도하여 IL-2를 생성하는 기능은 M5-90보다 강하고, INF- gamma;를 생성하는 기능은 M5-90보다 약하였다. 그리고 Delta;pgm 유전자 결손 균주를 로즈벵갈 평판응집 실험(rose bengal plate agglutination test)과 시험관응집실험(tube agglutination test)으로 검사한 결과 응집반응이 없었으며, 또한 웨스턴 블럿법(Western blot)으로 검사한 결과, Delta;pgm는 생쥐를 유도하여 pgm 단백질을 저항하는 항체를 생성시킬 수 없다는 것이 입증되었다. 본 실험에서 구축한 Delta;pgm는 우수한 유전 안정성과 면역원성이 있었는데, 이는 브루셀라균 유전자 결손 백신을 연구 제조하기 위한 실험적 근거를 제공하였다. |
