Cloning, Expression and Characterization of β-glucosidase from Stachybotrys chartarum
기관명 | NDSL |
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저널명 | 生物技術通報 = Biotechnology bulletin |
ISSN | 1002-5464, |
ISBN |
저자(한글) | YU, Hai-ling,LI, Shu-wei,WANG, Hua-ming |
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저자(영문) | |
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소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2013-01-01 |
초록 | 본 연구는 흑국균(Aspergillus niger) G1를 숙주균으로 하고, 검은 곰팡이(Stachybotrys chartarum)에서 얻은 beta;-글루코시다아제를 흑국균 G1 내에 발현시켰다. 우선 검은 곰팡이의 전유전체를 분석하여 인코딩한 beta;-글루코시다아제 유전자를 확보하였고 프라이머도 설계하였으며 PCR 증폭을 걸쳐 g10158를 얻어 벡터 pGm 내에 클론하면서 흑국균 G1 내에 형질전환시켰다. 그리고 amdS 평판에서 2차 선별을 걸쳤고 PCR 기법으로 검증도 함으로써, 최종적으로 효소 활성이 좋은 흑국균의 재조합 미생물 공학균인 G1-pGm-g10158-13을 확보하였다. SDS-PAGE로 측정한 결과, 발현 단백질의 분자 크기는 87.9kD였으며 음성 대조군 내에는 이 유전자 밴드가 없었다. 효소학적 특성을 분석한 결과, 이 beta;-글루코시다아제의 가장 적합한 반응 온도는 50℃였으며 가장 적합한 pH는 4.8이었다. 가장 적합한 pH과 가장 적합한 온도 조건에서 조 효소액의 활성은 1856.48U/mL까지 도달하였다. 결론적으로, 검은 곰팡이의 beta;-글루코시다아제 유전자를 흑국균 G1 내에 성공적으로 발현시켰으며 재조합체가 높은 활성을 보였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART69979794 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | β-Glucosidase,Stachybotrys chartarum,Aspergillus niger G1,Prokaryotic expression,β-글루코시다아제,검은 곰팡이,흑국균 G1,원핵 세포 내 발현 |