저자(한글) |
FENG, Yu-liang,HUANG, Ming-yue,WANG, Fei,CAO, Qi-long,FENG, Jia-xun,DUAN, Cheng-jie |
초록 |
탄수화물 결합 모듈(carbohydrate-binding module, CBM)은 일부분 탄수화물 활성 효소(carbohydrate-active enzymes)의 비촉매(non-catalytic) 부분이며, 주로 기질과 특이적으로 결합하여 인근 촉매 도메인이 용해가 불가능한 기질에 대한 촉매 효율을 향상시킨다. CBM 중의 보존적인 방향족 아미노산은 일반적으로 해당 단백질의 기질 결합 위치이다. 아미노산 위치 지정 돌연변이 기술을 이용하여 CBM 중 결합 위치의 핵심 아미노산을 검색하고 입증할 수 있다. 본 연구의 전기 단계에서 CBM 46200 의 기질 결합 능력은 같은 가족의 기타 구성원보다 많이 약한 것을 발견하였다. 또한, 다중 서열 정렬(multiple sequence alignment)을 통하여 가족 중의 일부 보존적인 방향족 아미노산은 CBM 46200 가운데 비방향족 아미노산으로 대체된 것을 보였다. 이 현상은 CBM 46200 의 기질 결합 능력이 약한 원인일 것이다. 해당 원인을 토의하는 것은 연구 전기 단계에서 감정한 새로운 가족 CBM의 광범위한 특이성 연구에 중요한 의미를 가지고 있다. 본 연구에서는 아미노산 위치 지정 돌연변이 기술, 친화성 젤 전기영동 기술 및 단백질의 용해 불가능한 다당 흡착 기술을 이용하여 앞의 추론을 입증하였다. 연구 결과, CBM 46200 의 위치 지정 돌연변이체가 다당 기질에 대한 결합 능력은 증강되지 않고 심지어 약해졌다. 이로써 해당 비방향족 아미노산이 CBM 46200 에서의 대체는 CBM 46200 의 다당 결합 능력이 기타 가족 구성원보다 약한 원인이 아니었고 CBM 46200 의 기질 결합 능력에 영향을 미치는 기타 요소가 존재할 가능성이 있는 것을 밝혔다. 본 논문에서는 해당 가능한 요소를 추측하였다. |