Prokaryotic expression and purification of cantharidin receptor protein, phosphatase 2A catalytic subunit, from Plutella xylostella L.
기관명 | NDSL |
---|---|
저널명 | 環境昆蟲學報 = Journal of environmental entomology |
ISSN | 1674-0858, |
ISBN |
저자(한글) | ZHENG, Lin-qing,HAO, Shao-dong,ZHANG, Zhi-yong,WANG, Jin-zhong,YANG, Bao-dong,ZHANG, Min-zhao |
---|---|
저자(영문) | |
소속기관 | |
소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2014-01-01 |
초록 | 배추좀나방(Plutella xylostella L.) 칸타리딘 수용체 PP2Ac 단백을 얻기 위해, 칸타리딘 수용체 결합 메커니즘 등 관련 연구 결과에 근거하여 배추좀나방 cDNA을 뎀플링으로 하고 PCR 기법으로 증폭시켜 배추좀나방 PP2Ac 유전자를 얻었다. 그리고 PP2Ac 유전자를 HindⅢ과 BamH I로 이중효소 처리를 수행한 pET-30a 원핵발현 벡터에 연결하여 재조합 플라스미드를 얻었으며 pET30a-PX-PP2Ac라고 명명하였다. pET30a-PX-PP2Ac를 대장간균 BL21에 전환하여 유도 발현시킨 후 표적 단백질을 획득하였다. 그리고 Ni-아가로스 겔을 사용하여 재조합 단백질을 순화하였다. 실험 결과, 배추좀나방 PP2Ac 유전자는 대장간균에서 발현될 수 있으며, 표적 단백질은 서로 다른 온도에서 봉입체(Inclusion body) 형식으로 존재하였다. 최적화 후의 유도 발현 조건은 IPTG 농도가 0.2 mM, 온도가 30℃였다. 해당 조건에서 표적 단백질의 크기는 약 38 KD이었다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75838584 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
---|---|
ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Plutella xylostella L.,PP2Ac,prokaryotic expression,purification,배추좀나방,PP2Ac,원핵 발현,단백질 순화 |