| 저자(한글) |
ZHANG, Dong-hui,ZHENG, Xue-li,LI, Hao,ZHOU, Zhi-min,WU, Jing-long,SUI, Dan-dan,HAN, Chong-xuan |
| 초록 |
난 투명대 3(zona pellucida 3, ZP3) 단백질은 정자와 난자의 결합과 관련되는 가장 중요한 수용체이다. Myospalax ontanierii의 난 투명대 3 유전자의 진핵 발현 벡터를 구축하고자, 본 연구에서는 PCR기법을 이용하여 제한효소 절단위치의 mZP3 조각을 얻었으며, 이를 진핵 발현 벡터 pEGFP-N1에서 클로닝한 후, 중국 햄스터 난소세포(Chinese hamster ovary cell, CHO cell)에 체외 형질주입하고 쿤밍 쥐(Kunming mice)의 미정맥에 체내 주사하였고, RT-PCR과 Western bolt기술을 이용하여 그 발현 상태를 검출하였다. 이중효소 절단과 유전자 시퀀싱에 의한 감정 결과는 발현 벡터 pEGFP-mZP3이 구축되었음을 설명한다. 도립 현미경으로 녹색 형광을 생성하는, 성공적으로 형질주입된 세포를 관찰할 수 있었다. RT-PCR와 Western bolt 검출 결과, 표적 유전자 mZP3은 CHO 세포에서 성공적으로 발현되었으며, 쥐 간장 내에서도 표적 유전자를 검출할 수 있었다. 연구 결과는 난 투명대 3 유전자가 CHO 진핵 세포 내에서 발현할 수 있다는 것을 설명하며, 향후 유전자 백신을 이용하여 Myospalax ontanierii를 방제하는 근거를 제공하였다. |
