저자(한글) |
ZHAO, Li-xia,ZHANG, Jin-dun,ZHANG, Jian,LI, Yun-xia,SU, Jie,SUN, Wei,ZHAO, Gao-ping,DAI, Yan-feng,GUO, Ji-tong,HU, Shu-xiang,WANG, Wei,LIU, Pen-tao,LI, Xi-he |
초록 |
레토바이러스 매개물로 핵 전사인자 Oct4, Sox2, Klf4, c-Myc를 발현하여 체세포를 유도다능성 줄기세포(induced pluripotent stem cells,iPSc)로 재구성한다. 지금까지 작은 쥐(mouse),사람, 큰 쥐, 돼지, 양, 말, 소의 iPS세포를 보고되었지만 큰 동물 iPS의 다기능성 특히 키메라형성 및 생식세포 계대배양은 아직 확인되지 않았다. 레토바이러스와 달리 piggyback 형질주입 효율은 높고 바이러스 성질이 없으며 조작 또한 편리하며 전이효소가 존재한 상황에서 안전하게 절개할 수 있다. piggyback 전사인자 Oct4, Sox2, Klf4, c-Myc, Rarg 및 Lrh 16개 핵 전사인자를 이용하여 소 섬유아세포를 유도한 것은 최초이다. 이는 소 iPS세포를 성공적으로 얻었고 그 형태는 쥐의 배아줄기세포와 흡사하다. 클론변계는 뚜렷하고 언덕모양이며 클론속의 세포가 치밀하며 핵 또한 크다. RT-PCR 및 면역조직 화학염색법으로 분석결과 소 iPS 세포발현 다기능성 유전자로 나타난다. 이 부류의 세포는 생체외 유도분화로 배유사체 EB를 형성할 수 있으며 또한 3개 배엽의 유전자를 발현할 수 있다. 체내 유도분화는 테라토마를 형성하는데 헤마톡시린 및 에오신 염색 결과 종양은 3배엽의 분화로 나타난다. 위에 결과에서 보듯이 piggyback 트랜스포손(전좌)을 이용하여 제조한 소 다기성 줄기세포 유도기술은 가능한 것이며 생성한 소의 iPS세포는 잠재한 다능성을 갖고 있다. |