| 저자(한글) |
MENG, Chuang,WAN, Ting,XU, Zheng-zhong,SHAN, Fa,FAN, Feng,CHEN, Xiang,JIAO, Xin-an |
| 저자(영문) |
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| 소속기관 |
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| 소속기관(영문) |
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| 출판인 |
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| 간행물 번호 |
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| 발행연도 |
2015-01-01 |
| 초록 |
【목적】대장균(Escherichia coli) 시스템의 발현을 이용하여 결핵균(Mycobacterium tuberculosis)의 MPT83 단백질을 정제한 후, 생쥐 모델을 통하여 그 면역원성을 평가하고 혈청학적 간접 ELISA법을 구축하여 소결핵증(bovine tuberculosis)의 임상 진단에 이용함으로써 그 응용 잠재능을 평가하고자 한다. 【방법】pET30a(+)-mpt83 재조합 플라스미드를 구축한 후, BL21(DE3)에 형질도입시켜 그 발현을 유도하고 정제하였다. 세포 표면 분자에 대한 유동세포계수법(Flow Cytometry, FCM) 분석, ELISPOT 시험 등을 통하여 생쥐 내 면역원성을 분석하였으며, 간접 ELISA법을 구축하고 임상 젖소의 혈액 샘플을 진단하여 소결핵증의 임상 진단을 관한 응용 잠재능을 평가하였다. 【결과】SDS-PAGE을 통하여 표적 단백질이 성공적으로 발현되었다는 것을 알 수 있었으며, Western blot를 통하여 토끼 유래 항원 H37Rv의 다중클론성 항체가 양호한 면역 반응성을 갖고 있음을 입증하였다. FCM 결과, 수지상세포 표면의 CD80 분자의 발현이 하향조절되었으며, 생쥐 비장의 CD4 + 과 CD8 + T 세포 표면의 CD69의 발현이 상향조절되었다. ELISPOT 결과, 이에 의해 유도된 특이성 IL-4 분비세포의 수는 IFN-γ 분비세포의 수보다 뚜렷하게 많았으며, Th2형 면역반응을 나타냈다. ELISA법을 구축하여 임상 젖소의 혈액 샘플 200본을 진단한 결과, 소결핵의 말초혈액γ-인터페론(interferon)의 체외 방출시험 결과와의 양성 일치율 및 음성 일치율이 각각 48.6% 및 90%였다. 【결론】대장균 시스템에서 효과적이고 가용적으로 발현되는 MPT83은 생쥐 모델에서 주요하게 Th2형 면역반응을 나타냈다. 해당 단백질을 항원으로 소결행증의 혈액학적 진단을 위한 간접 ELISA법을 구축하였다. |
| 원문URL |
http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART74178092 |
| 첨부파일 |
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