| 초록 |
a. 원시선-유사 중배엽 집단, 임의적으로, CD56+, PDGFR알파+ KDR- 원시선-유사 중배엽 집단을 i. FGF 효능제; ii. BMP 억제제; 임의적으로 노긴, LDN-193189, 도소모르핀; 및 iii. 임의적으로, TGF베타 억제제, 임의적으로 SB431524; 및 Wnt 억제제, 임의적으로 DKK1, IWP2, 또는 XAV939 중 하나 이상의 것을 포함하는, 축주위 중배엽 특정화 칵테일과 함께 배양하여 세포 표면 CD73, CD105 및/또는 PDGFR-베타를 발현하는 축주위 중배엽 집단을 특정화하는 단계; b. i. 임의적으로 무혈청 또는 혈청 함유 배지 중에서 CD73, CD105 및/또는 PDGFR-베타를 발현하는 축주위 중배엽 집단을 고세포 밀도로 배양하고; ii. 무혈청 배지 중에서 고세포 밀도의 CD73+, CD105+ 및/또는 PDGFR베타+ 축주위 중배엽 집단을 TGF베타3 효능제와 함께 배양하여 고세포 밀도의 Sox9+, 콜라겐 2+ 연골세포 전구체 집단을 제조하는 것을 포함하는, 연골세포 전구체 집단을 생성하는 단계; 및 c. i. 장기간 동안 고세포 밀도의 Sox9+, 콜라겐 2+ 연골세포 전구체 집단을 TGF베타3 효능제와 함께 배양하여 관절 유사 비-비대성 연골 세포 및/또는 연골 유사 조직을 제조하거나; 또는 ii. 장기간 동안 고세포 밀도의 Sox9+, 콜라겐2+ 연골세포 전구체 집단을 BMP4 효능제와 함께 배양하여 비대성 연골세포 유사 세포 및/또는 연골 유사 조직을 제조하는 단계를 포함하는, 연골세포 및/또는 연골, 임의적으로 관절 유사 비-비대성 연골 세포 및/또는 연골 유사 조직 및/또는 비대성 연골세포 유사 세포 및/또는 연골 유사 조직을 생성하는 방법. |
