초록 |
hPSC로부터 심혈관 계통 세포를 수득하기 위한 방법 및 생성물을 제공한다.인간 만능 줄기 세포 (hPSC)로부터 심근세포 계통 또는 심장외막 계통 세포 집단을 수득하는 방법은 하기 단계 중 하나 이상의 단계를 포함한다: (a) BMP 성분으로 프라이밍된 hPSC를, hPSC가 심혈관 중배엽 세포 집단으로 분화되도록 유도하는 데 적합한 심혈관 중배엽 프로그래밍 칵테일과 프로그래밍 칵테일이 hPSC에 침투하기에 적합한 조건하에서 접촉시키고, 일정 기간 동안 접촉된 hPSC를 배양하여 KDR+ 및 PDGFR알파+ 심혈관 중배엽 세포 집단을 생성하는 단계; (b) 심혈관 중배엽 세포 집단을, NKX2-5+ 또는 WT1+ 심혈관 전구체 세포 집단을 특정화하는 데 적합한 심혈관 전구체 특정화 칵테일과 특정화 칵테일이 심혈관 중배엽 세포 집단에 침투하기에 적합한 조건하에서 접촉시키고, 일정 기간 동안 접촉된 심혈관 중배엽 세포 집단을 배양하여 NKX2-5+ 또는 WT1+ 심혈관 전구체 세포 집단을 생성하는 단계; 및 (d) 심혈관 전구체 세포 집단을 성숙 칵테일과 성숙 칵테일이 심혈관 전구체 세포 집단에 침투하기에 적합한 조건하에서 접촉시키고, 일정 기간 동안 접촉된 심혈관 전구체 집단을 배양하여 심혈관 집단, 임의적으로, 심장 트로포닌 T (cTnT) 및/또는 SIRPA를 발현하는 심근세포 계통 세포, 및/또는 WT1을 발현하는 심장외막 계통 세포를 생산하는 단계. |