| 초록 |
본 발명은 아미노 말단에서부터 목적 단백질, LPXTG의 아미노산 서열로 이루어지는 펩타이드, 솔테이즈 A 절단 기능 도메인 및 태그의 순서로 포함하는 자가절단 융합 단백질, 이를 코딩하는 핵산, 본 발명의 핵산을 포함하는 발현벡터, 및 본 발명의 발현벡터로 형질전환된 세포에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 형질전환된 세포를 배양하여 용해 및 정제하는 단계를 포함하는 목적 단백질의 정제방법에 관한 것이다. 본 발명은 솔테이즈 A 절단 기능 도메인과 이의 인식 서열인 LPXTG의 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드로 이루어진 자가 절단 카세트를 포함하는 자가 절단 융합 단백질에 관한 것으로, 목적 단백질의 정제 및 태그 제거 과정을 별도의 과정이 아닌 한 번의 정제 과정으로 완료할 수 있다는 점에서 매우 유용하다. 특히, 목적 단백질의 위치가 아미노 말단에 존재함으로써 융합 단백질의 컬럼 결합 능력과 자가 절단 능력을 높인 점, 태그가 제거된 목적 단백질을 고순도로 얻을 수 있는 점, 절단-버퍼를 통해 정제 및 태그 제거 과정이 한 번의 과정으로 완료되어 정제에 필요한 시간 및 노력이 획기적으로 감소되는 점, 및 한 번의 단계로 이루어지기 때문에 수득 단백질의 손실이 감소되는 점에서 고순도 및 대량의 단백질이 필요한 다양한 분야에서 널리 이용될 수 있다. 특히, 치료용항체-약물 결합체 제조에 유용하다. |
