| 초록 |
유전학적 질환, 전염성 질환 및 암에 대한 선별, 법의학, 농업용 육종 및 개량을 포함하는 다양한 분야에 유용한 경제적 올리고뉴클레오티드 프라이밍에 의한 유전자 서열내의 상이성 (돌연변이)을 탐지하는 것으로, 간소하며 신속성이 있고, 하이브리드화를 위한 어떠한 필터도 필요치 않으며, 고체 고정체와 함께 사용될 수 있으며 모든 과정은 비용을 감소시키기 위하여 자동화될 수 있는 방법에 제공한다. (A)특정 올리고뉴클레오티드 프라이머를 각각의 특정 공지 서열과 어닐링 시키고, (B)각각의 어닐링된 프라이머를 이들의 3' 말단으로부터 연장시켜 프라이머에 어닐링된 서열과 상보적인 연장 생성물을 합성하고, (C)프라이머 연장 생성물과 합성되어있는 주형으로부터, 프라이머 연장 생성물을 분리시켜 일본쇄 분자를 생성하고, (D)공지의 특정 서열을 함유하는 일본쇄 분자를 어닐링, 연장 및 분리단계를 적어도 1회 반복하므로써 증폭시키며, (E)경쟁적 올리고뉴클레오티드 프라이머를 시료에 가하고, (F)실질적으로 상보적인 프라이머를 경쟁적 조건하에 특정 공지 서열과 우선적으로 하이브리드화시키며, (G)우선적으로 하이브리드화된 프라이머를 이의 3' 말단으로부터 연장시켜 분쇄에 상보적이고 본쇄와 하이브리드화하는 경쟁적 연장 생성물를 합성하고, 경쟁적 연장 생성물을 동정하여 핵산 본쇄 혼합물이 함유된 시료중에서 다수의 특정 공지 핵산 서열의 유무를 탐지한다. |
