초록 |
[과제] 당쇄의 비환원 말단에 시알산이 α2,3 결합 또는 α2,6 결합한 당쇄의 중요성이 알려져 있어, 이들 당쇄 화합물에 대한 공업적 생산이 요구되고 있다. 특히 당단백질 의약품의 제조시에는 시알산의 결합양식(α2,6 결합 또는 α2,3 결합)을 제어하여 균일 구조의 당쇄를 양산하는 것이 불가결하다. 특히 3분기형 또는 4분기형의 N-형 복합형 당쇄에 대해서 일반적으로 화학적으로 모든 비환원 말단에 시알산을 갖는 당쇄를 합성하는 것은 곤란한 것으로 생각되어, 동 당쇄를 화학적으로 합성하였다고 하는 보고는 없다. 또한 효소학적으로도 이들 당쇄를 효율적으로 조제하는 것은 곤란하였다. [해결수단] 본 발명에서는 시알산 전이효소가 CMP 존재하에 있어서 반응 생성물 상의 시알산을 분해하는 활성을 새롭게 발견하고, 생성되는 CMP를 효소적으로 분해함으로써 시알산 함유 당쇄를 효율적으로 제조 가능한 것을 발견하였다. 또한 종래 합성이 곤란하였던 α2,6 결합으로 시알산이 4분자 부가된 4분기 N-형 당쇄에 대해서도 2분기형 당쇄를 원료로 하고 당쇄 신장반응을 행하여, 각 효소반응 후의 정제를 행하지 않고 원 포트 합성으로 고수율로 조제할 수 있는 것을 발견하였다. |