| 초록 |
영장류 세포에서 관심 유전자의 돌연변이체 대립유전자를 교정하는 방법을 개시한다. 본 방법은 a) 함께 작용하여 돌연변이체 대립유전자에 이중 가닥 파단을 도입하는 비자연적으로 발생된 표적화된 뉴클레아제 및 부위 특이적 뉴클레오티드 결합 가이드를 영장류 세포 내로 도입하는 단계로서, 여기서, i) 상기 영장류 세포는 유사 세포 분열 중이고; ii) 상기 영장류 세포는 돌연변이체 대립유전자에 대해 이형접합성인 게놈을 포함하여, 상기 게놈은 돌연변이체 대립유전자 한 카피 및 야생형 대립유전자 한 카피를 포함하고; iii) 상기 야생형 대립유전자에 상동성인 단일 가닥 올리고뉴클레오티드는 영장류 세포 내로 도입되지 않는 것인 단계를 포함한다. 본 방법은 또한 b) 상기 영장류 세포가 돌연변이체 대립유전자에서 이중 가닥 DNA 파단의 상동성 지정 수복을 활성화하도록 하여, 수복 주형으로서 정상 야생형 대립유전자를 사용하여 돌연변이체 대립유전자를 교정하고, 야생형 대립유전자에 대해 동형접합성인 영장류 세포를 생산하는 단계를 포함한다. 영장류 세포는 단세포 배아 및/또는 인간 세포일 수 있다. |
