| 초록 |
본 발명은 강력한 혈관신생 유도 단백질인 인간 안지오제닌을 코딩하는 안지오제닌 유전자를 tac 프로모터의 조절하에서 대장균의 Omp A 분비 신호서열에 융합시켜 생물학적 활성이 유지된 상태로 발현시키는 재조합 발현벡터, 전기 재조합 발현벡터로 형질전환된 재조합 미생물 및 전기 재조합 미생물을 이용한 인간 안지오제닌의 대량 제조방법에 관한 것이다. 본 발명자들은 인간 안지오제닌 유전자를 강력한 tac 프로모터 조절하에 있는 대장균의 Omp A 분비 신호서열을 포함하는 벡터에 삽입하여, 대장균의 Omp A 분비 신호서열과 인간 안지오제닌의 융합단백질을 발현하는 재조합 발현벡터를 구축하였다. 그런 다음, 전기 재조합 발현벡터로 형질전환된 재조합 대장균의 배양액으로부터 재조합 단백질을 수득하고 칼럼크로마토그래피로 정제하여, 안지오제닌 단백질이 세포외로 효율적으로 분비되며 생물학적 활성을 유지하고 있음을 확인하였다. 본 발명에 의하면, 생물학적 활성을 유지하고 있는 안지오제닌을 간편하고 신속하게 대량 발현하여, 종래의 생산 방법에서 제기되어 왔던 낮은 수율과 저하된 생물학적 활성의 문제점을 극복함으로써, 안지오제닌의 생리학적 기능 연구에 이바지 할 수 있으며, 혈관생성유도제로 안지오제닌을 약리학적으로 이용할 수 있을 것이다. |
