| 초록 |
본 발명은 듀얼 스테이지 접선 유동 한외여과 (dual stage tangential-flow ultrafiltration: 'TFF') 를 사용하여 관심 분자를 상기 분자를 함유하는 용액으로부터 분리하는 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명의 방법은 후속하는, 즉, 다운스트림에서의 청징 (refining) 단위 조작 이전에 오염물 및/또는 불순물의 수준을 극적으로 감소시키기 위한 조건화 세포 배양물 상청액과 같은 미가공 공급물 스트림의 처리에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 발효 또는 다른 세포 배양 공정과 같은 생물학적 생산 시스템으로부터의 미가공 공급물 스트림의 처리에 사용될 수 있으며, 크로마토그래피 단위 조작과 같은 높은 불순물 로드에 민감한 다운스트림 공정 이전의 시간 소모적인 불순물 침전 (예를 들면, pH 에 의한) 및/또는 침전물 여과 공정에 대한 필요성을 추가로 제거할 수 있다. 개시되는 듀얼 스테이지 TFF 공정은 상기 공급물 스트림, 예를 들면, 세포 배양물 상청액의 pH 에 상응하는 pH 또는 대략 이의 pH, 전형적으로는 7.5±1.0 의 pH 에서 유리하게 수행될 수 있는 2 개 이상의 TFF 단위 조작을 조합한다. 공급물 스트림에 대한 관심 단백질의 전통적인 정제 공정을 보완, 개선 또는 대체하기 위한 TFF 단위 조작의 사용은 직접 및 간접 가공비 둘다에 있어서 유의미한 절약을 제공할 수 있다. 예를 들면, 침전 및 침전물 여과 공정의 제거에 의한 간접 절약에 추가하여, 듀얼 스테이지 TFF 단위 조작에 의해 제공되는 불순물 로드의 감소는 다운스트림 컬럼 성능, 예를 들면, 크로마토그래피 분리, 동적 결합 능력, 작동 수명의 개선 및/또는 필요한 컬럼 크기의 감소에 의한 간접 절약을 초래할 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 방법은 면역글로불린 분자, 예를 들면, 항체의 정제를 위한 공정에서 사용되는데, 여기서, 상기 공정은 친화도 정제 단계, 예를 들면, 단백질 A 친화도 크로마토그래피 정제를 가지지 않는다. |
