| 초록 |
아비딘을 포함하는 포획반응물을 사용하여 아비딘-바이오틴 복합체를 분해하여 진단방법, 핵산서열결정 및 법의학적 시험에 유용한 바이오티닐화된 핵산을 제공한다. (1) 최소한 하나의 핵산 바이오티닐화된 목표핵산인 수성의 핵산 혼합물을 아비딘 또는 그의 유도체 분자가 공유적으로 결합되어 있는 기질과접촉하여 목표핵산의 수불용성 복합체가 기질상에 형성되도록 하고, 이에 결합되지 않은 물질을 분리한 후, 복합체를 충분한 시간동안 76도C 이상에서 가열하여 아비딘-바이도틴 결합을 파괴하여 바이오티닐화된 목표핵산을수집하고, (2) 중합효소 연쇄반응 및 최소한 하나의 바이오티닐화 프라이머를 사용하여 시료 중의 목표핵산을 증폭하고, 이를 아비딘 또는 그의 유도체가 공유적으로 결합되어 있는 기질과 접촉하여 아비딘 또는 그의 유도체및 바이오티닐화된 목표핵산의 수불용성 복합체를 기질상에 형성하고, (3)목표핵산과 이에 상보적인 최소한 하나의 올리고뉴클레오티드 프로브를 접촉하여 수불용성 하이브리드 생성물이 형성되도록하고 하이브리드화되지 않은 수용성물질을 분리하고, 수불용성 하이브리드 생성물과 효소-아비딘 결합체를 접촉하여 하이브리드 생성물과 결합체 사이에 수불용성 복합체가 형성되도록 하여 시료중의 목표핵산의 양의 척도로써 수불용성 복합체를 검색한다. |
