| 초록 |
Ⅰ. 연구결과 요약문 총괄 : Single 항생제에 대한 내성 유전자는 다양한 type으로 구성 되어 있어, tet gene은 41종, erm genes은 6종 이상 그리고 penicillin에 내성을 나타내는 bla genes에는 약200종의 types가 알려져 있다. 본 연구에서는 수산 생물 내에서 나타나는 이러한 다양한 내성 유전자를 정성적 그리고 정량적 관점에서 다양한 방법으로 분석 비교 하고, 나아가서는 사람에서 분리한 내성균이 함유하는 유전자와의 비교까지 실시하였다. 1. 2008년 12월 22일부터 발효되고 있는 수산생물질병관리법에 의하여 관상어가 규제 대상에 포함되므로 하여 이들에서의 내성균 발생 또는 수입 관상어의 위험성 분석은 국내·국외적인 분쟁 해결을 위하여 더욱 요구되고 있다. 수입된 담수 관상어와 국내에서 양식되는 해산어로부터 얻은 장내 세균에 존재하는 다양한 항생제에 대한 내성균의 비율과 함께, 여러 특징적인 tetracycline (Tc) 내성 유전자 분포를 알아보고 두 그룹에서 나타나는 주요 tet gene의 특성 비교를 최초로 비교 하였다. 2. 그러므로 연구 첫해에는 싱가포르로부터 수입된 관상어를 분석·비교하였고 다음년도에서는 여러 아시아에서 수입된 담수 관상어에 대비한 국내산 담수 관상어 및 해산어 장내 세균의 항생제 내성 특성을 확인하였다. 그리고 셋째해에는 항생제 내성결정 인자의 특성이 국내에서 생산된 어류와 분포 발현 그리고 내성 level에서 어떠한 차이를 보이는지에 대한 비교 분석을 실시하였고, 나아가서는 분리된 하나하나의 분리 내성균 유전자의 정성적 분석 위에서 qPCR 을 이용한 총 microflora (즉 In situ microflora)내의 내성유전자 type별로의 gene load (tet gene 유전자 부하) 분석까지도 실시하여 내성균에서의 유전자 부하라는 새로운 개념을 도입 하였다. 3. 그리고 실질적으로 어류에 항생제를 투여하여 내성균 유도를 이루고, 이에 대한 유전적 분석을 실시하여 현장에서 분리된 내성균의 유전자와 비교 분석하여 다양한 농도의 항생제 투여에 의하여 변화된 어류 장내의 microflora 내의 실질적인 내성균 발생에 대비한 내성 유전자의 정량적 부하의 kinetics 분석을 qPCR을 활용하여 정량적으로 비교 하였다. 4. 이어서 S. iniae의 quinolone 내성 획득에 관여하는 gyrA, gyrB, parC, parE gene의 염기 서열을 최초로 결정하였으며 quinolone의 내성 획득과 이러한 유전자들의 변이와의 관계를 설명하였다. 또한 양식 어류에 있어 연쇄구균증의 원인이 되는 것으로 알려진 S. parauberis, L. garvieae, S. iniae의 내성 양상을 비교, 분석하여 그 특징적 변화를 밝혀 양식현장에 도움이 되게 하였다. 5. 이는 보다 더 발전 되어 사람과 해양환경에서 분리된 Tc 내성 Staphylococci 중 tet(M)을 가진 균주를 선별한 다음, tet(M)의 세부적인 유전적 분석을 통하여 사람과 해양환경 분리균 간의 내성 유전자 communication 특성을 유추하고자 하였다. 그 결과 아직 사람과 해양 생태계간에는 뚜렷한 유전적 이동이 이루어지지 않고 비교적 분리된 상태로 있음을 확인 하였다. 그리고 해양 생태계에서만 존재하는 새로운 transposon 염기배열 특성을 확인 하였다. |
