초록 |
■ 연구개발 내용 1 : 유전자 조작없는 역분화 줄기세포 유래 신경줄기세포의 생산 및 발생학적, 해부조직학적, 세포생물학적 및 분자생물학적 특성 규명. - Integration-free lentivirus, 세포투과가 가능한 단백질의 tagging, 저분자성 물질을 이용하여 유전자 조작없는 역분화 줄기세포 유래 신경줄기세포의 확립. - 면역염색법, RT-PCR, Realtime-PCR, western blot을 이용한 역분화 줄기세포 유래 신경줄기세포의 세포생물학적, 분자생물학적 특성 확인. - 신경줄기세포 특정 발달과정과 특정 위치에서 발현하는 유전자 마커를 이용하여 역분화 줄기세포 유래 신경줄기세포의 발생학적, 해부조직학적 특성 확인. ■ 연구개발 내용 2 : 다양한 세포를 이용한 임상적용이 가능한 역분화 신경줄기세포주 생산. - 다양한 시스템을 이용하여 다양한 체세포에 직접적 역분화 후보인자를 도입함으로써 역분화 신경줄기세포로의 직접적 역분화 생산 조건을 최적화. - 확립된 다수의 유도신경줄기세포주를 분자생물학적 측면과 자기재생능 및 분화능 등의 세포생물학적 측면에서 비교분석하여 제 3, 4, 5 세부에서 진행하게 될 임상연구에 공급. - 저분자성 물질을 이용하여 직접적 역분화에 필요한 최소의 필수인자를 선발. ■ 연구개발 내용 3 : 역분화 신경줄기세포의 기능성 및 안전성 검증을 통해 임상적용 가능한 신경줄기세포주 확립. - 각각의 역분화 신경줄기세포의 신경세포, astrocytes, oligodendrocytes 세포로의 분화능 및 분화효율 조사. - 분화된 신경세포의 전기생리학적 기능성 조사와 생체 내 시냅스 형성유무 조사. - 역분화 신경줄기세포의 세포배양 과정 중의 염색체 또는 유전자 변형등을 확인함으로써 안전성 조사. ■ 연구개발 내용 4 : 뇌경색 질환 동물모델에 역분화 신경줄기세포 이식을 통한 치료효과 검증. - 허혈성 손상받은 신경세포와 역분화 신경줄기세포의 혼합 배양으로 치료 효능의 검증. - 세포 생존도의 분석을 통해 확립된 역분화 신경줄기세포 주마다 회복 효율을 비교. - 뇌경색 신경 질환 동물에 이식 후 MRI를 통한 뇌경색 부분 측정으로 회복 효과를 분석. ■ 연구개발 내용 5 : 척수손상 동물모델에 역분화 신경줄기세포 이식을 통한 치료효과 검증. - 확립된 역분화 신경줄기세포 주의 척수 질환 동물모델 이식의 적합성 여부 분석. - 척추 질환 동물모델에 이식 후 생착률과 분화능 검증. - 기간별로 신경행동학적 검사를 통해 신경기능의 회복 능력을 확인. (출처 : 보고서 요약서) |