초록 |
〔1차년도〕 ∘ 산겨릅나무의 5가지 용매 분획물(Hexane, Dichloromethane, Ethyl acetate, n-BuOH, D.W.)을 제조하여, 각각 3.64g, 9.8g, 23.8g, 82.8g, 74.2g의 농축액을 얻음 ∘ D.W.(distilled water) layer의 유효물질은 페놀류의 배당체인 Salidroside와 coumarin 계열의 배당체인 fraxin으로 밝혀짐 ∘ 산지별 (망대암산, 계방산, 두위봉, 태백산) 원료를 확보하여 지역별 성분 패턴을 분석함 ∘ HepG2 세포주를 이용하여 n-Hexane, EtOAc, BuOH, Water 분획물에 대하여 세포독성 평가에서 헥산분획물과 물층분획물에서 유효한 효능을 나타내었으며, 이후 물층에 대한 15개의 소분획물 중 W2, W7분획물에서 중성지방 축적억제 효능을 나타냄 ∘ 산겨릅나무의 지표성분을 선정하고 분석법을 확립함 ∘ 산겨릅나무자생지 6곳을 확보하여 생육환경을 규명하고 번식실험으로 통하여 번식특성을 조사함 〔2차년도〕 ∘ HepG2 세포에서 활성분획물로 확인된 EtOAc Fraction에서 15개의 성분을 동정함 ∘ HepG2 세포에서 산겨릅나무 열수 추출물, 50% 에탄올 추출물 및 EtOAc 분획물의 세포 독성 평가, 중성지방 축적 억제효과 그리고 간세포 내 지방축적 억제평가를 진행함 ∘ 알코올성 지방간 유도마우스에서 산겨릅 추출물의 지방간 억제 효과를 확인함 ∘ 산겨릅 추출물 투여에 따른 알코올성 지방간 유도 마우스의 혈중 알코올 농도 분석을 진행함 ∘ HPLC-UV 를 이용하여 4가지 유효(지표) 후보물질이 동일한 조건에서 분리될 수 있는 분석법을 확립하고 확립된 분석법으로 시료의 함량분석 및 밸리데이션을 수행함 ∘ 산겨릅나무 자생지의 입지환경, 토양특성 및 식생구조분석 (Braun-Blanquet)의 조사방법을 이용하여 분석함 ∘ 증식실험(종자번식, 삽목번식)을 통하여 증식체계를 확립함 〔3차년도〕 ∘ 산겨릅나무 추출물의 안전성평가(세포, 동물)를 수행함 ∘ 해당지표물질의 LC-MS을 이용한 약물동태학적 연구를 통해 PK parameter를 산출함 ∘ 산겨릅나무 유효분획물과 유래 저분자화합물을 이용한 지방간동물모델에서의 효능평가 진행함 ∘ 산겨릅나무 추출물의 IND보고서를 작성함 ∘ 산겨릅나무 유효 분획물에서 분리⋅동정된 11종의 HPLC 동시분석법을 확립함 ∘ 번식실험 및 적응시험을 통한 최적의 증식방법체계를 확립함 (출처:보고서 요약서 3p) |