| 초록 |
오리바이러스성간염은 1주령이하에 매우 치명적인 질병으로 급성의 경과와 높은 폐사율로 오리산업에 큰 피해를 주는 오리질병임. 빠르게 경과하는 질병의 병인기전을 밝히고 면역반응의 특성을 파악하여 방어면역과 연관된 주요지표의 분석을 통해 질병예방을 위한 합리적인 방법을 모색하고, 적절한 백신프로그램의 구축을 제시하고자 함. 또한 백신 후 3일 만에 방어능을 획득하는 특이적으로 빠른 백신의 조기면역기전을 밝혀볼 수 있음 병인기전의 분석을 위해 1형 오리간염바이러스를 실험감염시키고, 시간대별 폐사율을 확인한 결과, 20시간 후부터 폐사가 시작되어 28시간 후에 전수 폐사를 확인함으로써 매우 빠른 질병의 경과를 확인할 수 있었음. 폐사한 개체는 간에서 모두 전형적인 병변인 점상 및 반상의 출혈소견을 보였고, 일부 개체에서 담낭부종, 신장 울혈 등의 소견을 관찰하였음. 실험감염 후 장기별로 6, 12, 24, 28, 32시간째에 바이러스 정량분석을 실시한 결과, 12시간째 처음으로 간, 비장, 담낭에서 확인할 수 있었음. 특히 담낭의 경우 5회에 걸친 검사 결과에서 모두 5 log이상의 높은 수치를 확인할 수 있었고, 간의 경우 24-28시간에 가장 높은 수치를 나타냄. 이 결과를 통해 감염의 최고치는 감염 후 24시간 경과 시에 이루어짐을 알 수 있었음. 조직학적 분석의 결과에서도 24시간 경과된 시료에서 간, 비장, 신장에서의 병변을 확인할 수 있었고, 이는 바이러스 정량분석결과 5 log이상의 높은 수치를 보였던 장기들과 일치하는 결과였음. 간 손상 정도를 확인하기 위한 간효소수치 검사결과 AST는 12시간 경과 후, ALT는 24시간 경과 후 가장 높은 상승을 보였고, ALT의 경우 폐사양상과 유사한 농도변화가 나타남을 확인하였음 백신접종 후 면역반응을 평가하기 위해 ELISA분석방법을 조건설정 하였고, 백신 후 3, 7, 28, 35일째에 혈청을 확보하여 백신항체역가를 측정한 결과, 35일째에 증가된 수치를 확인할 수 있었음. 백신의 방어면역지표를 평가하기 위해 백신그룹과 백신 후 공격접종 그룹에 대해 cytokine수준을 분석하였음. 그 결과 분석한 cytokine중 INF-α에서 백신 후 24시간 후에 급격히 증가하여 약 50배까지 증가했다가 곧바로 감소하는 것을 확인함으로써 백신조기방어와 연관성을 갖는 지표로서 판단해 볼 수 있었음. 또한 백신 후 시 간대별 lymphocyte proliferation수준을 평가하기 위해 조건설정실험을 실시하였음. 그 결과 cell수는 2x10 6 cell/ml, 배양온도는 41.6℃, 배양시간은 48시간으로 설정함. 또한 mitogen은 PHA 10ug/ml을 cell seeding 18시간 후 처리하는 것으로 조건을 설정하였음. 백신 후 dpv별로 PBMC와 splenocyte에서의 lymphocyte proliferation을 측정하여 백신 면역반응의 지표로 활용할 예정임 오리바이러스성간염의 질병발현기전을 세밀히 파악하고 면역반응의 특성분석을 위해 백신 후 세포성 및 체액성 면역의 지표를 분석하여, 주요 면역지표의 역할에 접근해볼 수 있었음. 또한 더 나아가 본 연구를시작으로 지속적인 면역반응의 연구를 통해 오리의 특징적이고 강한 방어면역분야의 심화된 연구성과를 얻을 수 있을 것으로 기대됨 ( 출처 : 연구결과 요약문 3p ) |
