| 초록 |
1. 연구내용 1차년도 아데노바이러스 연구의 문제점들 중 하나인 암세포에 대한 비특이성을 해결하기 위해, 기존의 CMV promoter 대신에 암세포에만 특이적으로 발현하는 progression elevated gene (PEG) promoter로 치환한 아데노바이러스를 개발하고자 하였다. PEG promoter를 이용하면, 정상세포의 독성을 줄이면서 암세포에 대한 반응도를 향상시킬 수 있을 것으로 예상하였다. PEG promoter 분리 동정을 시도하였고, 아데노바이러스에 삽입할 유전자인 TRAIL, IL-24, GFP, CMV를 동정하였다. AdenoQuick system을 이용하여 아데노바이러스 제작을 준비하였다. 2차년도 PEG promoter의 동정 실험이 예상 보다 지연되어서 합성 제작하였고, 아데노바이러스에 삽입할 유전자의 동정을 완료하였다. PEG promoter에 TRAIL 유전자 또는 IL-24 유전자를 장착한 아데노바이러스를 제작하기 위해 ligation, transformation을 실험을 진행하였다. 3차년도 PEG promoter를 삽입한 아데노바이러스의 제작이 예상 보다 지연되었다. PEG promoter에만 집착하여 연구를 진행하는 경우에 발생될 문제들을 고려하여 다른 연구들을 병행하였다. PEG promoter 외에 암세포에 특이적인 telomerase reverse transcriptase (hTERT) promoter를 장착한 아데노바이러스의 제작과 adenosine monophosphate activated protein kinase (AMPK)를 발현하는 아데노바이러스를 이용한 연구를 동시에 진행하였다. hTERT promoter를 TRAIL 및 IL-24 유전자와 ligation시키고, 아데노바이러스 발현 플라즈미드에 삽입하고자 하였다. 현재 hTERT promoter를 이용한 아데노바이러스 제작 중에 있다. AMPK 발현 아데노바이러스와 방사선의 병용 요법에 대한 연구가 진행 중에 있다. 2. 연구과정 연구 기간 중 예상치 않은 변수들로 인해 연구 과정이 지연되었고, 이를 보상하기 위해 보다 개선된 결과를 도출할 수 있는 연구로 계획을 변경하였다. 하지만 예기치 못한 변수들 (세포 오염, 정전, 실험 프로토콜의 오류 등)로 인해 불가피하게 실험이 지연되어서 결과의 생성에 어려움이 있었다. 그리고 바이러스와 방사선을 병용한 실험이 많지 않아서, 참고로 이용한 자료들의 신뢰도에도 문제가 있었다. 3. 향후 연구 실적 제출 계획 연구가 많이 지체되었지만, 애초 목표하였던 TRAIL 발현 아데노바이러스와 방사선 병용 효과에 대한 연구를 완수하여 연구 실적으로 보고할 예정이다. 2차성 당뇨병의 일차 처방약인 metformin의 처치로 당뇨병 환자들에서 암발생이 낮고, 암세포의 성장이 억제된다는 최근 연구 결과들에 주목하고 있다. 여러 연구들에서 metformin 투여 후 AMPK의 발현이 증가되고, 이로 인해 mTOR 등의 세포 성장을 촉진하는 단백질의 활성이 저하되어서, 암세포의 증식이 저하된다고 보고되고 있다. 본 연구자의 자문 교수가 소속된 약리학 교실에서 AMPK를 발현하는 아데노바이러스를 확보하고 있어서, 본 연구자는 현재 암세포를 대상으로 AMPK 발현 아데노바이러스와 방사선의 병용 효과에 대한 연구도 진행 중에 있다. 이른 시일 내에 결과를 연구 실적으로 보고할 계획이다. (출처 : 연구결과 요약문(국문) 4p) |
